Question

测定水样是否符合饮用水卫生标准，常用滤膜法测定大肠杆菌的数目。流程如图所示，滤膜法的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红美蓝的培养基(EMB 培养基)上培养→统计菌落数目。据图回答问题：

(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的是___________。与过滤有关的操作都要在_______________旁进行。

(2)将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的_________操作。从物理状态角度分析，EMB 培养基属于___________培养基。

(3)某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将 10ml 待测水样加入到 90ml 无菌水中，稀释后的菌液通过滤膜法测得 EMB 培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为________个。

(4)该同学进一步思考，利用滤膜法也可能用于测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样，一份待测水样来自变酸的果酒，另一份来自明德中学屈子湖，若要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，为了减少细菌的干扰，应选择孔径________(填 “更小”或“不变”或“更大”)的滤膜。

Answer

滤杯、滤膜和滤瓶 酒精灯火焰 接种 固体 3100 更大

【解析】

滤膜法是检测水样中大肠细菌群的方法，将一定量水样注入已灭菌的微孔薄膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于伊红美蓝培养基上，经培养后计数和鉴定滤膜上生长的大肠菌群菌落即可推测计算出水样中的大肠杆菌数；伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料，大肠杆菌在伊红-美蓝培养基的菌落呈深紫色，并有金属光泽。

（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，其中需要进行灭菌处理的有滤杯、滤膜和滤瓶，与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌的污染。

（2）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，这属于微生物培养中的接种操作。从物理状态角度分析，EMB培养基属于固体培养基。

（3）某生物兴趣小组的某同学尝试按照上述方法进行测定，无菌操作下将10ml 待测水样加入到90ml无菌水中，即稀释了10倍，稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数平均为124，黑色菌落数平均为31，黑色菌落为大肠杆菌，则推测1升待测水样中的大肠杆菌数目为31×100=3100个。

（4）若要通过测量蓝藻的数目来研究水华，应更换上述过滤装置中的滤膜，由于单个蓝藻细胞的直径比细菌细胞的大，应选择孔径更大的滤膜。