Question

酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素，以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题：

（1）从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，从功能上分析，该培养基属于________培养基。该培养基的氮源来自_________。

（2）筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是___________和_____________。配制浓度梯度为10^-1的系列稀释液时，需用移液管将lmL菌液移入盛有____mL蒸馏水的试管中。

（3）对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量_______（多于／等于／小于）后者，其原因是________________________。

（4）若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时，应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。下表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况，从表中看出，海藻酸钠的浓度应选用__________g／dL。若利用固定化酶技术，它的优点是___________________。

海藻酸钠质量浓度（g/dL）	凝胶强度	凝胶气泡量	成球难度	凝珠形状
1.0	中	没有	较易	扁圆形
2.0	中	少量	易	圆球形
3.0	强	较多	稍难	有托尾
4.0	强	大量	难	难成球形

Answer

选择 尿素 平板划线法 稀释涂布平板法 9 多于 有些菌落连接在一起，计数偏小 2.0 可重复利用，且利于产物的纯化

【解析】

1、培养基按功能分：

2、从土壤中筛选酸性脲酶生产菌，要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，碳源应该使用葡萄糖。 
3、在固体培养基上接种常用的方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法，使用稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果可能会偏小。

（1）培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等，其中尿素是唯一的氮源，因此从功能上分析，该培养基属于选择培养基。 
（2）在固体培养基上接种常用的方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时，需用移液管将lmL菌液移入盛有9mL蒸馏水的试管中。

（3）使用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于有些菌落连接在一起统计成了一个菌落，故计数的结果可能会偏小。而血球计数板计数可能会将死的菌体计数在内，因此，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作，则前者的数量多于后者。 

（4）分析在不同浓度海藻酸钠条件下形成的凝胶珠状况，海藻酸钠质量浓度为2.0g/dL时，凝胶气泡量较少，凝胶球为椭圆形且容易成球，即用海藻酸钠固定酵母菌R时海藻酸钠的浓度应选用2.0g/dL；利用固定化细胞技术可使被固定的细胞重复利用，且利于产物的纯化。