Question

研究发现产琼脂糖酶的细菌和琼脂糖酶在制备原生质体、回收DNA与RNA方面有着重要的用途。以琼脂（一种多糖的混合物）为唯一碳源的培养基培养该细菌，培养一段时间，滴加某种染色剂后有透明圈出现。回答下列问题：

(l)常选用琼脂作为培养基凝固剂的原因是____。

(2)用添加琼脂的培养基接种产琼脂糖酶的细菌，该细菌的菌落周围会出现__________现象。

(3)某小组在分离纯化产琼脂糖酶的细菌时，先培养产琼脂糖酶的细菌，再滴加染色剂。

①该种方法的优点是___________，不足的是___________。

②一般挑取___________的菌落进行纯化培养。

③若纯合培养时采用平板划线法接种，则常用的接种工具是___________，在平板上进行连续多次划线的目的是_______________。

Answer

化学性质稳定、冷却45℃时即凝固、透明度高、保水性好 凹陷或液化 透明圈的出现基本上是产琼脂糖酶细菌作用的结果 操作繁琐、染色剂会使得菌落之间发生混杂（杂菌污染） 透明圈明显（大） 接种环 将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，以便获得单菌落细菌

【解析】

据题文的描述可知：本题考查学生对微生物的纯化培养与分离的相关知识的识记和理解能力。

(1)由于琼脂的化学性质稳定、冷却45℃时即凝固、透明度高、保水性好，所以常选用琼脂作为培养基凝固剂。

(2) 用添加琼脂的培养基接种产琼脂糖酶的细菌，因该细菌产生的琼脂糖酶可催化琼脂水解，所以该细菌的菌落周围会出现凹陷或液化现象。

(3) ①结合对(2)的分析可知：在分离纯化产琼脂糖酶的细菌时，先培养产琼脂糖酶的细菌，再滴加染色剂，其优点在于透明圈的出现基本上是产琼脂糖酶细菌作用的结果，不足之处是操作繁琐、染色剂会使菌落之间发生混杂（杂菌污染）。

②该细菌的菌落周围出现的透明圈越大，说明该细菌产琼脂糖酶的活性越高或产琼脂糖酶的能力越强，因此一般挑取透明圈明显（或透明圈大）的菌落进行纯化培养。

③采用平板划线法接种微生物时，常用的接种工具是接种环。在平板上进行连续多次划线的目的是：将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，以便获得单菌落细菌。