Question

通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以________作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，目的是___________________________________________________。

（2）在实验室进行酵母菌培养时，为检验使用的培养基灭菌是否合格，最简单的操作方法是____________________________________________________________________________。 

（3）某同学甲尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________________；从接种后酵母菌生长情况推测该同学接种时可能的操作失误是________________________。

（4）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________（填“工程酵母菌”或“普通酵母菌”）的发酵罐需要先排气，其原因是：______________。

Answer

淀粉 进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌 将未接种的培养基放在适宜温度恒温箱中（倒置）培养一段时间，观察是否有菌落生成 稀释涂布平板法 涂布不均匀 工程酵母菌 工程酵母菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生CO2的速率更快

【解析】

1．菌种纯化的方法有：稀释涂布平板法、平板划线法、单菌落挑取法； 2．实验设计的原则有：等量对照原则、单一变量原则、平行重复原则等，注意排除无关变量干扰； 3．灭菌的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。灼烧灭菌适合于接种工具的灭菌，一般来说是在操作过程中金属类的接种工具。干热灭菌适合于玻璃器皿、金属工具的灭菌。高压蒸汽灭菌适合于玻璃器皿、接种工具以及培养基，特别注意培养基的灭菌只能用高压蒸汽灭菌。

（1）为筛选得到高效利用淀粉的工程酵母菌菌种，固体培养基应以淀粉作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，多次重复筛选是为了获得高效利用淀粉的工程酵母菌菌种，进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌。

（2）设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度，在实验室进行酵母菌培养时，为检验使用的培养基灭菌是否合格，最简单的操作方法是空白对照，即将未接种的培养基放在适宜温度恒温箱中（倒置）培养一段时间，观察是否有菌落生成。

（3）由图乙的结果表明，该同学采用的是稀释涂布平板法，其操作的失误是涂布不均匀，造成平板上的菌落未均匀分分布。

（4）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，由于工程酵母菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生CO2的速率更快，所以接种工程酵母的发酵罐需要先排气。