Question

资料一：一份“实验报告”的部分内容

(一)解离：剪取洋葱根尖5cm，放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合液(体积比为1:1)的玻璃皿中，在室温下解离3～5min。

(二)染色：把根尖放在盛有0.01g/mL龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3～5min。

(三)漂洗：将根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。

(四)制片：将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上载玻片，用拇指轻轻按压载坡片……

资料二：全班20个实验小组观察的实验数据汇总为：间期细胞880个，前期细胞67个，中期细胞18个，后期和末期细胞共35个。

(1)请改正“资料一”中的3处错误：_________________，__________________，___________________。

(2)若已知洋葱根尖分生区细胞的细胞周期为12.0h，请根据“资料二”，计算出间期约为________________h(精确到小数点后一位)。

(3)龙胆紫溶液和醋酸洋红液都是________性染液。

(4)有些因素会影响细胞周期各时期的长短，实验过程中也会产生一些误差。下列对整个实验结果可能产生影响的因素有___________。

①取材时间 ②根尖培养温度 ③解离时间长短 ④载玻片厚度 ⑤计数的细胞是否属于分生区细胞 ⑥细胞周期各时期区分是否准确

Answer

取材5cm改为2～3cm 先漂洗再染色 盖上盖玻片再加盖载玻片 10.6 碱 ①②③⑤⑥

【解析】

观察洋葱根尖有丝分裂实验： 
1、解离：剪取根尖2～3mm（最好在每天的10-14点取根，因此时间是洋葱根尖有丝分裂高峰期），立即放入盛有质量分数为15%的氯化氢溶液和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）的玻璃皿中，在室温下解离3～5min。 
2、漂洗：待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。 
3、染色：把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的培养皿中，染色3～5min。 
4、制片：取一干净载玻片，在中央滴一滴清水，将染色的根尖用镊子取出，放入载玻片的水滴中，并且用镊子尖把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片再加一载玻片。然后，用拇指轻轻地压载玻片．取下后加上的载玻片，既制成装片。 
5、观察： 
①、低倍镜观察把制成的洋葱根尖装片先放在低倍镜下观察，要求找到分生区的细胞，它的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。 
②、高倍镜观察找到分生区的细胞后，把低倍镜移走，直接换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整的既清晰又较亮，直到看清细胞物象为止。仔细观察，找到处于有丝分裂的前期、中期、后期、末期和间期的细胞。

（1）根据上述分析可知，临时装片制作步骤中的3处错误为：①“取材5cm”改成“取材2～3cm”；②实验操作步骤应改为先漂洗后染色；③将“盖上载玻片”改成“盖上盖玻片后，再加一片载玻片”。

（2）若已知洋葱根尖分生区细胞周期为12小时，显微镜下计数各时期的细胞数目为：间期880个，前期67个，中期18个，后期和末期35个，则880：（880+67+18+35）=x：12，解得x=10.6h，即间期所占时间为10.6h。

（3）染色体易被碱性染料染成深色，而醋酸洋红液和龙胆紫都是给染色体染色的染剂，所以均为碱性染料。

（4）有些因素会影响细胞周期各时期的长短，实验过程中也会产生一些误差；①上午10时至下午2时细胞正在分裂的数量多，因此取材时间会产生误差；②温度能影响酶的活性进而影响细胞分裂过程，因此根尖培养温度也会产生误差；③解离程度会影响细胞能否分散开来，进而影响显微观察，因此解离时间长短会产生误差；④载玻片厚度不会影响观察，故不会产生误差；⑤计数的细胞是否属于分生区细胞会对计算细胞周期产生误差；⑥细胞周期各时期区分是否准确会影响各期细胞数的正确统计，因此也会产生误差；综上分析，上述各因素中，对整个实验结果可能产生影响的有①②③⑤⑥。