Question

下图中的供体DNA中含有无限增殖调控基因，该基因能激发动物细胞的分裂，图示是利用该基因和小鼠制备新型单克隆抗体的过程。

（1）该过程的目的基因是_________，质粒被酶A切割后形成_________个游离的磷酸。经酶A处理后的Ⅰ与质粒可产生相同的_________，所以能够实现重组。

（2）图中将目的基因导入受体细胞的适宜方法是_________，Ⅱ细胞是已免疫_________。

（3）通常用_________培养基进行筛选获得Ⅲ细胞，Ⅲ细胞的特点是既能无限增殖，又能_________。

（4）该过程涉及到的生物技术有_________（答出两点）。

Answer

无限增殖调控基因2黏性末端显微注射法B淋巴细胞选择性产生专一性抗体转基因技术（DNA重组技术）、动物细胞培养技术

【解析】

分析题图：酶A是限制性核酸内切酶；酶B是DNA连接酶。II细胞具有分泌抗体的能力；重组细胞Ⅲ既有无限增殖的能力，又能分泌特异性抗体。图中涉及的技术主要有转基因技术和动物细胞培养技术。

（1）据图可知，图示是利用该基因和小鼠制备新型单克隆抗体的过程，因此需要细胞III既能无限增殖又能产生抗体，细胞III内应含有无限增殖调控基因，即无限增殖调控基因是该过程的目的基因，质粒被酶A切割后，质粒变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团。经酶A处理后的Ⅰ与质粒可产生相同的黏性末端，所以能够实现重组。

（2）将目的基因导入不同细胞用不同的方法。导入植物细胞：农杆菌转化法（转基因抗虫棉用的是花粉管通道法）；导入动物细胞：显微注射技术（注射入受精卵中）；导入原核生物：一般是将细菌用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。图中的受体细胞为动物细胞，因此采用的适宜方法为显微注射法，图中是生产单克隆抗体的过程，因此Ⅱ细胞是已免疫B淋巴细胞。

（3）单克隆抗体制备过程中，总共有两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，两次筛选均需要用选择性培养基进行筛选获得Ⅲ细胞，Ⅲ细胞的特点是既能无限增殖，又能产生专一性抗体。

（4）据图可知该过程涉及到的生物技术有转基因技术（DNA重组技术）、动物细胞培养技术。