Question

乳铁蛋白不仅参与铁的转运，而且有调节免疫的功能，被认为是一种新型抗菌、抗癌药物。科研工作者利用基因工程将人乳铁蛋白基因导入牛的受精卵中，从牛分泌的乳汁中提取乳铁蛋白。请回答下列问题：

（1）将人的乳铁蛋白基因导入牛的受精卵并最终在牛的乳腺细胞中表达，需将人的乳铁蛋白基因与

__________等调控组件重组在一起构成基因的表达载体，其中表达载体中标记基因作用是_____________。

（2）将导入乳铁蛋白基因的受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查___________，当胚胎发育到

______时期时，就可以移植到经过处理的受体母牛子宫。

（3）为了获得雌性奶牛，需对培养的早期胚胎性别进行鉴定。目前最有效最准确的方法是SRY-PCR法，

操作的基本程序是：从被测囊胚的____________(填“部位”）中取出几个细胞，提取DNA；然后

用位于__________(X、Y)染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段碱基作____________，以提取的胚胎细胞DNA为模板，进行PCR扩增；最后用SRY特异性探针对扩增产物进行检测。

（4）利用上述转基因牛的乳腺细胞通过动物体细胞核移植，可在较短时间内培育出大量能生产人乳铁蛋白

的牛。在体细胞核移植过程中，要把转基因牛的体细胞细胞核移入到_______________(时期）去核卵母细胞中，然后用物理或化学方法激活该细胞使其完成__________________进程。

Answer

乳腺蛋白基因的启动子 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来 受精状况和受精卵的发育能力 桑椹胚或囊胚 滋养层 Y 引物 减数第二次分裂中期 细胞分裂与发育

【解析】试题分析：基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）构建基因表达载体时，需将人的乳铁蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，表达载体中的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

（2）将导入乳铁蛋白基因的受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力；当胚胎发育到桑椹胚或囊胚时期时，就可以移植到经过处理的受体母牛子宫。

（3）性别鉴定取的是滋养层细胞，提取该细胞的DNA，然后用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段碱基作引物，以提取的胚胎细胞DNA为模板，进行PCR扩增；最后用SRY特异性探针对扩增产物进行检测。

（4）在体细胞核移植过程中，要把转基因牛的体细胞细胞核移入到减数第二次分裂中期去核卵母细胞中，然后用物理或化学方法激活该细胞使其完成细胞分裂与发育进程。