Question

的血清白蛋白在临床上需求量很大，利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的血清白蛋白。回答问题：

（1）在培育转基因奶牛时，应将血清白蛋白基因与乳腺蛋白基因的______________等调控组件重组在一起，通过______________技术将其导人奶牛的受精卵中。

（2）导入目的基因的受精卵需培养到__________________阶段才可进行胚胎移植。暂不移入的早期胚胎可使用______________方法保存。

（3）进行胚胎移植前需要进行______________________，目前最有效最准确的方法是SRY — PCR法，操作的基本程序是:从被检测的囊胚中取出几个______________细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，若未出现杂交链，则胚胎性别为____________，而基因工程中的______________步骤也会用到DNA探针。

Answer

启动子 显微注射 桑椹胚或囊胚 冷冻（或“低温”） 性别鉴定 滋养层 雌牛 目的基因的检测和鉴定

【解析】1、体外受精过程包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、体外受精，其中卵母细胞的采集和培养的方法：（1）主要方法是：用促性腺激素处理，使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精．（2）第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；
（3）第三种方法：是直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，叫活体采卵．
2、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始

（1）将人的血清白蛋白基因导入奶牛受精卵最为有效的方法是显微注射技术，导入基因前，需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤属于基因工程“四步曲”中的核心步骤，其中将血清白蛋白基因与调控组件结合时必须用到限制性核酸内切酶和DNA连接酶；

（2）导入目的基因的受精卵需培养到桑椹胚或囊胚阶段才可进行胚胎移植。暂不移入的胚胎可使用冷冻（或低温）方法保存，具体方法是放入-196℃（零下196°C）的液氮；

（3）进行胚胎移植前需要进行性别鉴定，目前，对胚胎的性别进行鉴定的最有效最准确的方法是SRY-PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个滋养层细胞，提取DNA；然后用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段碱基作引物，在热稳定DNA聚合酶（Taq酶）催化作用下进行PCR扩增；与SRY特异性探针出现阳性反应（杂交链）者，说明其含有Y染色体，为雄牛，若未出现杂交链，则胚胎性别为雌牛，而基因工程中的目的基因的检测和鉴定步骤也会用到DNA探针。