利用基因工程技术培育转基因抗冻番茄，该过程需要用多种限制酶，如图依次表示EcoR I、Sma I、Nae I三种限制酶的识别序列及切割位点，
请回答：
（1）上述限制酶在特定位点切割DNA，其实质是断开DNA分子每条链中特定部位的两个核苷酸之间的_________，切割后产生了_________末端。
（2）利用EcoR I 和Nae I酶切得某种鱼的抗冻蛋白基因，可与被EcoR I 和Sam I酶切后的质料连接成重组质料，原因是______________________________________________________。
（3）重组质粒导入番茄后，欲检测抗冻蛋白基因是否转录出mRNA，需利用_________作探针。
（4）利用抗冻蛋白制备出相应的_________，然后进行抗原-抗体杂交，观察到杂交带出现，尚不足以确定转基因抗冻番茄培育是否成功。因此，还应将转基因番茄_________，以确定其耐寒能力是否提高。
（5）应用PCR扩增目的基因时，需要在基因组数据库中查询目的基因的_________序列，以便合成引物。PCR过程第一轮循环的模板是____________________________________。
水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：
（1）要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌，应采用以_____________作为唯一的碳源的选择培养基，实验中还应设置对照组。将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显______（多于/少于）选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。
（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用__________计数板直接计数。若将100ml含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1ml稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100ml原菌液中有PVA分解菌_______个，该方法的测量值与实际值相比一般会_________（偏大/偏小/相等）。
（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入碘用于鉴别PVA分解菌。要比较不同菌株降解PVA能力的大小，用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定___________________来确定不同菌株降解PVA能力的大小。
（4）提取橘皮精油，常采用_________而不用水蒸汽蒸馏法，原因是___________________________。
图甲为某草原生态系统的部分食物网，图乙表示能量流经初级消费者和次级消费者的分配情况，图丙为根据该生态系统的能量流动情况构建的能量金字塔。据图分析回答：
（1）图甲中属于D阶的生物有_________________________________。
（2）图甲中缺少的生态系统中的生物成分是_____________________，该成分在生态系统中的作用为_____________________________________________。
（3）该生态系统中初级消费者同化的能量中不经过次级消费者而直接流向分解者的能量最多有______J/(hm2×a)，第二营养级到第三营养级之间的能量传递效率为______。
（4）有的草原被害虫侵害，若无人工除虫，一段时间后害虫数量依然会维持相对稳定，原因是___________________________________________。
血糖浓度是人体健康状况的重要指标之一，保持血糖浓度平衡对机体生命活动具有重要作用，机体多种激素参与血糖浓度的调节。如图为胰岛素作用机理模式图，请分析回答：
（1）胰岛素降低血糖浓度的机理是：胰岛素与________结合后，一方面促进蛋白质、脂肪、糖原的合成；另一方面使________增加，促进葡萄糖进入细胞内氧化分解，同时抑制非糖物质转化为葡萄糖。
（2）某人因体内含有胰岛素受体的抗体而表现出高血糖症状。若给其注射胰岛素________（填“能”或“不能”）有效调节其血糖水平，原因是__________________________________________。
（3）人体感染某病毒后，胰岛B细胞会被自身的免疫细胞破坏，引起I型糖尿病，这是因为胰岛B细胞含有与该病毒相似的________（物质）。上述研究在对I型糖尿病患者进行胰岛移植前，科学家还需解决患者对B细胞________________的问题。
（4）胰岛素降解酶(IDE)在体内能从血液中移除胰岛素。IDE抑制剂的成功发现，为治疗糖尿病提供了新的方法。请据此分析：给糖尿病患者静脉注射胰岛素疗效不好的原因是_________________________________。
某油菜品系经多代种植后出现不同颜色的种子，已知种子颜色由一对基因A/a控制，并受另一对基因R/r影响。用产黑色种子植株（甲）、产黄色种子植株（乙和丙）进行以下实验：
（1）由以上实验可得出，种子颜色性状中黄色对黑色为______性，甲、丙的基因型分别为_______________。
（2）分析以上实验可知，当________基因存在时会抑制A基因的表达。实验二中F2产黄色种子植株中杂合子的比例为________。
（3）让实验二F2中黄色种子植株自交，后代能否出现黑色种子？________如果能出现，比例为________。
（4）有人重复实验二，发现某一F1植株，其体细胞中含R/r基因的同源染色体有三条（其中两条含R基因），请解释该变异产生的原因：______________________________________。
回答下列有关光合作用与呼吸作用的问题。
Ⅰ.为探究油菜素内酯（BRs，一种植物激素）能否缓解弱光对番茄光合作用的影响，研究人员设计了A、B、C、D四组实验，实验处理及检测番茄叶片Rubisco（一种可催化CO2与C5反应生成C3的酶）活性、Rubisco基因表达量、净光合速率所得结果如下：
A组：自然光照，Rubisco活性相对值为100%、Rubisco基因表达量相对值为100%、净光合速率相对值为100%；
B组：自然光照、叶面喷施一定浓度BRs，Rubisco活性相对值为98.3%、Rubisco基因表达量相对值为102%、净光合速率相对值为99.2%；
C组：弱光照（25%自然光照），Rubisco活性相对值为58.4%、Rubisco基因表达量相对值为35.0%、净光合速率相对值为57.2%；
D组：弱光照（25%自然光照），叶面喷施相同浓度BRs，Rubisco活性相对值为89.2%、Rubisco基因表达量相对值为71.0%、净光合速率相对值为72.0%。
请回答：
（1）Rubisco在番茄叶肉细胞的_____________中发挥催化作用。
（2）比较_____________组实验结果，表明弱光能导致番茄暗反应能力降低。
（3）自然光照下，叶面喷施一定浓度BRs_____________（填“促进”、“抑制”或“基本不影响”）番茄光合作用；A、C、D三组实验结果相比表明，BRs可通过提高__________________________，从而缓解弱光对番茄光合作用的影响。
Ⅱ.植物在光下吸收O2会产生CO2的现象称为光呼吸。
（4）研究表明光呼吸会消耗光合作用新形成有机物的四分之一，因此提高农作物产量需降低光呼吸，某同学提出了如下措施：①适当降低温度②适当提高CO2浓度，不一定能达到增产目的的措施是_______（填序号），理由是__________________________。
