Question

胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法。利用小鼠再生胰腺提取物（RPE）可定向诱导人

羊膜间充质干细胞（hAMSCs）分化成胰岛B细胞。回答问题：

（1）取人羊膜组织刮除血块的上皮细胞，冲洗后剪碎，然后用                     处理，最终制

成hAMSCs悬液，将细胞悬液放入培养瓶中进行原代培养，当细胞帖壁生长到一定阶段时，出现

现象，此时细胞停止分裂增殖，这时需要将细胞进行相关处理，然后进行传代培养。

取传至第3带的hAMSCs放入细胞培养板，同时加入RPE进行诱导分化培养。该代hAMSCs能

（2）保持细胞正常的                   。诱导分化培养15天后，提取细胞               ，用胰岛素基因探针进行分子杂交，可初步检测hAMSCs是否分化成胰岛B细胞。

（3）hAMSCs细胞在RPE作用下，可以定向分化形成具有正常胰岛B细胞功能的细胞，其根本原因

是                     。培养hAMSCs细胞的培养液中营养成分包括           （至少写两种）

人体器官移植面临的主要问题有供体器官短缺和免疫排斥，目前临床通过使用           抑制T

细胞的增殖来提高器官移植的成活率。

Answer

（1）胰蛋白酶 接触抑制

（2）核型 mRNA

（3）基因选择性表达 糖、氨基酸、无机盐、血清

（4）免疫抑制剂

【解析】

（1）要制成细胞悬液应用胰蛋白酶或胶原蛋白梅处理。细胞贴壁生长到一定阶段时，会出现接触抑制的现象，细胞增殖会停止。

（2）在10代之内的一般都能保持正常的细胞核型。因为是检测是否分化成胰岛B细胞，所以应提取mRNA，在胰岛B细胞中有特有的mRNA。

（3）细胞分化的根本原因是基因的选择性表达，动物细胞培养液中的营养成分包括糖类、氨基酸、无机盐还有天然成分血清或血浆。

（4）对于抑制T细胞的增殖可以使用免疫抑制剂，从而减弱细胞免疫来提高器官移植的成活率。

【考点定位】本题考查动物细胞工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

【名师点睛】动物细胞培养与动物体细胞核移植的不同点

动物细胞培养

动物体细胞核移植

原理

细胞增殖

动物细胞核的全能性

过程

结果

获得细胞群

获得克隆动物

应用

①生产生物制品

②用于基因工程

③检测有毒物质

①加速家畜遗传改良进程，促进良种繁育

②保护濒危物种

③生产医用蛋白

④提供克隆器官、组织等

易错警示 细胞工程的2个总结

（1）植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程，但植物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞不分化只分裂。

（2）克隆动物的起点是经过核移植后形成的重组细胞，其遗传物质主要来自供体，因此形成的个体性状主要同供体，但也有部分性状同受体。