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人心肌细胞中的肌钙蛋白由三个结构不同的亚基组成,即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋...

人心肌细胞中的肌钙蛋白由三个结构不同的亚基组成,即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC),其中肌钙蛋白I(cTnI)在血液中含量上升是心肌损伤的特异指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体,科研人员完成了以下过程。

 

1)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠一次,共注射三次,其目的是加强免疫,刺激小鼠机体产生更多的________________,最后一次免疫后第3天,取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合,常用动物特有的诱导方法是________

2)如果只考虑细胞两两融合,图甲可以_________种融合的细胞,其中能无限增殖的融合细胞是有________种;为了获得所需的杂交瘤细胞,应将甲放在______(填“选择”或“鉴别”)培养基上进行培养,在细胞培养中,为防止有害代谢物的积累,可采用________的方法。

3)甲、乙、丙中,只含杂交瘤细胞的是________,②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再检测,并多次重复上述操作,其目的是筛选获得能产生更多的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞,该抗体特点是________

 

B淋巴细胞 灭活的病毒(PEG) 3 2 选择 定期更换培养液 乙和丙 特异性强,灵敏度高 【解析】 据题可知本题考查单克隆抗体的制备,学生应熟记相应的基础知识,并灵活运用其解题。 (1)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠一次,共注射三次,其目的是加强免疫,刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞;诱导动物细胞融合常用的诱导因素是灭活的病毒(PEG)。 (2)如果只考虑细胞两两融合,图甲中可以得到B淋巴细胞和B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合、B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合等3种融合细胞,其中能无限增殖的融合细胞为后两种;为了获得所需的杂交瘤细胞,应将甲放在含HAT的培养基上进行选择培养;细胞培养中,为防止有害代谢物的积累对自身造成危害,可采用定期更换培养液的方法,以便清除代谢产物。 (3)图中①②依次表示单克隆抗体制备过程中的两次筛选,其中①第一次是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞,②第二次是通过克隆化培养和抗体检测筛选出能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。因此,甲、乙、丙中,只含杂交瘤细胞的是乙和丙;单克隆抗体的特点是特异性强,灵敏度高。
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考点分析:
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如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中BD两点表示经筛选后继续培养)。据图回答问题。

1)动物细胞培养要选用合适的培养基,根据培养基营养物质的来源不同,可将培养基分为_____培养基和合成培养基;在合成培养基中必须加入一定量的________,才能满足动物细胞培养的需要。

2)动物细胞培养过程中,为了防止杂菌污染,可在培养基中加入适量的___________,培养过程中还要通入适量的O2CO2,其中O2的作用是__________

3)图中______________段的培养所得的细胞与供体组织细胞生物学特征基本一致,称为________培养。

4 BC段的培养称为________培养;细胞培养和植物组织培养过程中,动植物细胞都要进行增殖或分裂,不同的是植物细胞还要进行___________

 

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花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。

1)过程①所需的酶是_______________,过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_________________(填“叶绿体”或“线粒体”)存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

2)原生质体经过________(填“细胞壁”或“细胞膜”)再生,进而分裂和______(填“脱分化”或“再分化”)形成愈伤组织。

3)原生质体融合的事例体现了细胞膜具有_____________(填“一定的流动性”或“选择透过性”),原生质体可以发育成完整的植株体现了植物体细胞的___________(填“全能性”或“完整性”)。

4)对杂种植株进行接种______________实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株;纵观整个流程图,这种生物技术称为_______________(填“原生质体”或“体细胞”)杂交技术

 

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绿色荧光蛋白(GFP)会发出绿色荧光,该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景。请据图回答相关问题。


 

1)图中形成重组质粒,需要限制性内切酶,如果限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—GGATCC—,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。在____________和上述两种不同限制酶的作用下,能否将质粒和目的基因连接起来?_________(填“能”或“不能”,理由是___________________________

2)在②过程进行转基因体细胞的筛选时,比较简易的筛选方法是通过设备检测,发出明亮的绿色荧光细胞即为转基因体细胞。绿色荧光蛋白在转基因体细胞的_______中合成,这是遗传信息的_____________(填“转录”或“翻译”)过程。

3)实施基因工程的核心步骤是__________(填图中数字标号)。

4)在以上③核移植过程中,供体细胞一般选用传代到______代以内的转基因体细胞,科学家通过改变氨基酸排序,造出能吸收、发出不同颜色光的荧光蛋白,并能让它们发光更久、更强烈。对荧光蛋白的改造属于___________工程。

 

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下图是利用基因工程办法生产人白细胞干扰素的基本过程图,据图回答:

1)①过程需要_______酶的参与。该酶的专一性很强,能别DNA分子中特定的_______序列,并使两条链中特定部位的_______________键断开。

2)②物质是从大肠杆菌a中分离出的质粒,其化学本质是_______(填“DNA”或“RNA”)。

3)一般将受体大肠杆菌b _________处理,使细胞处于能吸收周围环境中的DNA的生理状态,称为_____________细胞。

4)构建的表达载体(重组质粒),除含目的基因外,还必须有_________________和标记基因等。

 

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海岸生态护坡技术是人工在沿海边处构筑的迎潮坡,其迎潮坡由潮间带、潮上带和堤顶构成,在潮间带、潮上带和堤顶上种植不同植物,可有效抵御海潮的冲刷力。请回答:


 

 

害虫

害虫天敌

昆虫种类

蚜虫

螨虫

瓢虫

食蚜蝽

昆虫密度

393

034

029

033

 

1)运用生态护坡技术后,该海岸的群落演替类型为________演替,与自然条件下群落演替相比,该群落的建立改变了演替的______________

2)随着群落的演替,该海岸各种群的种群数量一般呈__________型增长。

3)研究人员调查护坡堤蚜虫的种群密度,常用的方法是_______________(填“样方法”或“标志重捕法”),理由是活动范围_______(填“小”或“大”)、活动能力_______________(填“强”或“弱”)。

4)表中蚜虫和瓢虫的种间关系是_______(填“捕食”或“寄生”);运用生态护坡技术后,生物种类与数量都有了比较大的提升,从而使得该生态系统的______(填“抵抗力”或“恢复力”)稳定性能力增强。

 

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