Question

下列有关基因工程技术的叙述，正确的是

A.不同的限制酶切割形成的黏性末端一定不同

B.PCR反应中周期性的温度设置是特定的，与扩增的目的基因和引物无关

C.在构建基因表达载体时通常需要大量的目的基因和载体

D.质粒上的目的基因都必须整合到受体细胞的DNA上并表达

Answer

C

【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

A、限制酶具有专一性，不同的限制酶切割形成的黏性末端也可能相同，也可能不同，A错误；

B、PCR反应中周期性的温度可在一定范围内设置，不是特定的，与扩增的目的基因和引物有关，B错误；

C、在构建基因表达载体时通常需要大量的目的基因和载体，这样获得基因表达载体的概率更高，C正确；

D、质粒本身也是DNA，也能自我复制，所以进入受体细胞以后，既可以自己进行表达，也可以整合到体细胞的DNA 并表达，D错误。

故选C。