Question

某生物兴趣小组用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的锥形瓶中，然后按图甲所示过程进行醋酸菌的纯化培养。回答下列问题。

（1）在菌种培养过程中，需将平板倒置，其主要目的是________。在操作B、C后，可根据菌落特征对醋酸菌进行筛选，原理是________________________。

（2）图甲中，液体培养的目的是________。

（3）图甲中，C过程采用的微生物计数方法是______。经培养后菌落在平板上的分布如图乙所示，推测接种时的操作失误是________。

（4）若测得稀释倍数为10⁶的培养基平板上，菌落数的平均值为254，则每毫升样品中的菌株数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0．1mL）_______。用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值________（填“小”或“大”），原因是________。

Answer

防止培养皿盖上的水珠落入培养基，避免培养基中的水分过快地挥发 一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征 增加醋酸菌的浓度 活菌计数法（或稀释涂布平板法） 涂布不均匀 2．54×109 小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

【解析】

分析图甲：接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其中过程A是指平板划线法接种，过程C是指稀释涂布平板法接种。

分析图乙：图乙是一个平板经培养后的菌落分布，可见其采用的是稀释涂布平板法，但图中菌落分布相对较集中。

（1）在菌种培养过程中，需要倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，也可以避免培养基中的水分过快地挥发。一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征，故可根据菌落特征对醋酸菌进行筛选。

（2）液体培养有利于醋酸菌的繁殖，从而增加醋酸菌的浓度。

（3）图甲C过程采用的是稀释涂布平板法接种，可以采用活菌计数法对微生物进行计数。如图乙所示菌落分布相对较集中，推测是接种时涂布不均匀导致的。

（4）若测得稀释倍数为106的培养基平板上，菌落数的平均值为254，则每毫升样品中的菌株数=254÷0.1×106=2.54×109。当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故用该方法统计的醋酸菌数目会比活菌的实际值小。