Question

埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。请回答下列问题：

（1）基因疫苗指的是DNA疫苗，要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗，首先要提取出病人的mRNA，并将mRNA___________形成DNA。

（2）以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染力，但保留有______________。为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白，必须将GP蛋白基因与_______________等调控组件重组在一起，才能驱动转录过程。通过_______方法，导入牛的___________这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为乳腺生物反应器。

（3）为了提高胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚或_____进行操作。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将_________。转基因牛是否分泌含GP蛋白的乳汁，可以通过_____________技术从分子水平进行检测。

（4）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的_______与鼠的癌细胞进行融合成杂交瘤细胞，培养后可以获得纯净的单一品种抗体，其特点是___________，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击EBO。

Answer

逆转录 抗原性 乳腺蛋白基因的启动子 显微注射 受精卵 桑椹胚 内细胞团均等分割 抗原-抗体杂交技术 B淋巴细胞 特异性强、灵敏度高，并可能大量制备

【解析】

本题考查了单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体。以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有抗原性。

（1） mRNA逆转录形成DNA，RNA在逆转录酶的催化下，逆转录成相应的DNA，要大量获得表达特异抗原的基因，可采用PCR扩增方法，体外大量增殖。

（2）以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有抗原性。为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白，在基因导入牛受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的（乳腺蛋白基因的）启动子，才能驱动转录过程。通过显微注射技术导入牛的受精卵。

（3）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚或桑椹胚进行操作。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割。转基因牛是否培育成功，可以通过抗原-抗体杂交技术从分子水平进行检测。

（4）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴（效应B或浆）细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，筛选后进一歩培养的是杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。可以用杂交瘤细胞产生的抗体与药物制成“生物导弹”，抗击埃博拉病毒。