Question

某同学为探究变质牛奶中细菌的种类，取ImL的样液，加入盛有9mL无菌水的试管中稀释，然后采用平板划线法对牛奶中的细菌进行分离和鉴别。请回答：

(l)将配置好的牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后，冷却到50℃左右时倒平板，平板冷凝后要倒置存放，原因是_______________________、_______________。

(2)平板划线时，在做第二次以及其后的划线操作，总是从上一次划线的末端开始，以便得到_____________________。

(3)划线操作结束时，仍然需要对接种环灼烧的理由是_______________________。接种完成后，平板放入培养箱中培养时是否需要倒置？__________（答“需要”或“不需要”）。

(4)如果要检测牛奶中是否含有大肠杆菌，需要在培养基中加入_____________（填物质），观察是否出现_____________（填颜色）的菌落。

Answer

防止皿盖上的水珠落入培养皿 避免培养基中水分过快挥发 得到由单个细菌繁殖而成的菌落 及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 需要 伊红美蓝 黑色（或蓝黑色）

【解析】

灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，适用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等。消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，适用对象主要有操作空间、某些液体、双手等。稀释涂布平板法常用来进行微生物的计数。大肠杆菌的鉴定需要使用伊红美蓝指示剂。据此分析作答。

（1）平板冷凝后要倒置存放，原因是防止皿盖上的水珠落入培养皿，同时避免培养基中水分过快挥发。

（2）平板划线法操作时，划线时，在做第二次以及其后的划线操作，总是从上一次划线的末端开始，目的是使下一次划线时的菌种只能来自于上一次划线的末端，以便得到由单个细菌繁殖而成的菌落。

（3）划线操作结束时，为及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，需要对接种环灼烧灭菌。接种完成后，平板放入培养箱中培养需要倒置。

（4）大肠杆菌的鉴定需要使用伊红美蓝指示剂，如果菌落呈 黑色（或蓝黑色）则为大肠杆菌菌落。