Question

幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：

配制培养基―→灭菌、倒平板―→X―→培养―→观察

请回答：

(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有___________，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现______色环带。

(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。

A．高压蒸汽     B．紫外灯照射     C．70%酒精浸泡  D．过滤

(3)步骤X表示________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液__________到培养基平面上。菌液稀释的目的是获得______个菌落。

(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在____中。若不倒置培养，将导致________。

(5)临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的________分解为NH₃和¹⁴CO₂。

Answer

脲酶 红 A 接种 涂布 单 恒温培养箱 无法形成单菌落 尿素

【解析】

由于细菌分解尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，pH升高，所以可以用检测pH变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，pH升高，指示剂变红。微生物接种的方法有稀释涂布平板法和平板划线法。稀释涂布平板法一般是将稀释液涂布到固体培养基上。

（1）幽门螺杆菌含有脲酶，能分解尿素为菌体提供氮源，因此在配制培养基时要加入尿素；加入酚红指示剂的目的是检验是否有Hp存在，若有Hp存在会分解尿素，培养基pH会升高，酚红指示剂将变红，则菌落周围会出现红色环带。
（2）由于尿素在高温下会分解，不能使用高压蒸汽灭菌法灭菌，A错误；紫外灯照射只能起到消毒作用，B错误；70%酒精浸泡只能起到消毒作用，且与尿素溶液混合成了混合液，C错误；由于尿素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用G6玻璃沙漏斗过滤，D正确。

故选D。

（3）微生物的分离和培养步骤是：配制培养基→灭菌、倒平板→接种→培养，故步骤X表示接种。接种时先将菌液稀释，目的是获得单一菌落，然后再涂布到培养基平面上。
（4）在培养时，需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中。若不倒置培养，将导致无法形成单菌落。
（5）如果人体感染了Hp，Hp能将尿素分解为NH3和CO2，故而用14C标记尿素中的C，可通过呼吸产物来判断是否感染Hp。