Question

分离土壤中尿素分解菌的实验操作中，无法分离得到尿素分解菌的原因最可能是

A. 制备浸出液的土壤取自土壤的表层

B. 涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌

C. 牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源

D. 接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒

Answer

C

【解析】

1、实验流程：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。 
2、实验室中目的菌株的筛选： 
①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度。pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 
培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

②方法：能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌。

取样一般取距离地表约3～8cm的土壤层，而土壤的表层中微生物数量也很大，因此该操作可能获得尿素分解菌，A不符合题意；涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌，这会导致杂菌污染，但由于在尿素为唯一氮源的培养基上只有能分解尿素的微生物才能生长，故该操作仍可获得尿素分解菌，B不符合题意；该培养基必须以尿素为唯一的氮源，不能使用牛肉膏蛋白胨培养基或在其中添加尿素作为氮源，否则大量的微生物都能生长，该培养基就无法起到选择的作用，即无法分离得到尿素分解菌，C符合题意；接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒，可能会造成污染，但对分离尿素分解菌影响不大，D不符合题意。

故选C。