Question

2013年4月16日国家卫生和计划生育委员会公布，全国共报告人感染H7N9禽流感确诊病例77例，其中16人已死亡，禽流感再度备受关注。医学界正在致力于研究预防H7N9禽流感病毒的疫苗和单克隆抗体。科学家决定采用基因敲除术将小鼠的Ig基因敲除，代之以人的Ig基因，然后用H7N9病毒去免疫小鼠，再经杂交瘤技术即可产生大量完全人源化抗体。下图是某科研机构的实验方案。请回答：

(1)此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的_______细胞，经技术处理后的该细胞，再重新植入小鼠脾脏中增殖。

(2)小鼠B淋巴细胞用B表示，小鼠骨髓瘤细胞用A表示，在培养液中，用灭活的动物病毒作促融剂，培养液中共有______种类型的融合细胞(只考虑两两融合)。

(3)第一次筛选是选出______型的细胞(用字母组合表示)，筛选具体方法是在培养基中加入某种物质，抑制骨髓瘤细胞DNA的复制，而B细胞DNA复制虽不受影响，但增殖能力很有限，只有杂交瘤细胞可以借助B细胞DNA复制的途径继续增殖。此种培养基称为_____培养基。

(4)将能产生抗H7N9病毒的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养，通常该培养液需加入_____等一些天然成分。

(5)利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了_______杂交技术。

Answer

B淋巴 3 AB 选择 动物血清、血浆 抗原-抗体

【解析】

单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体，该过程主要运用的细胞工程技术包括动物细胞培养和动物细胞融合技术。

（1）此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的B淋巴细胞细胞，因为B淋巴细胞可以产生抗体。

（2）在诱导细胞融合时，若考虑两两融合，则有AA、BB和AB三类细胞。

（3）第一次筛选是选出AB型的细胞，筛选具体方法是在培养基中加入某种物质，抑制骨髓瘤细胞DNA的复制，而B细胞DNA复制虽不受影响，但增殖能力很有限，只有杂交瘤细胞可以借助B细胞DNA复制的途径，继续增殖，此种培养基称为选择培养基。

（4）将能产生抗H7N9病毒的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养，其培养液与植物组织培养的MS培养基相比，特有成分是动物血清或血浆。

（5）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了抗体-抗原杂交技术。