Question

1978年，人类首次利用转基因技术生产出人胰岛素，其过程大致如图所示：

（1）人胰岛素由A、B两条肽链组成，可根据组成肽链的氨基酸序列，确定编码胰岛素基因的碱基序列，因此可通过____________方法获得目的基因。

（2）β- 半乳糖苷酶能将无色ONPG分解，产物呈黄色，本生产流程中β- 半乳糖苷酶基因作为___________，通过①和②，完成基因表达载体的构建，写出该过程处理DNA分子所需要的酶：________________________________。

（3）③表示将表达载体导入受体细胞，用Ca²⁺处理大肠杆菌，目的是使之变为____________细胞，利于外源DNA侵染，④表示利用化学方法催化二硫键的形成，合成具有生物活性的胰岛素，人体内该过程在胰岛B细胞的_________中进行。

Answer

（1）人工合成 （2）标记基因 限制酶和DNA连接酶 （3）感受态 内质网

【解析】

试题（1）基因工程中若已知组成肽链的氨基酸序列，可确定编码胰岛素基因的碱基序列，通过人工合成方法获得目的基因。

（2）β-半乳糖苷酶能将无色0NPG分解，产物呈黄色，故在本生产流程中β-半乳糖苷酶基因作为标记基因；构建基因表达载体需要限制酶和DNA连接酶。

（3）将基因表达载体导入大肠杆菌，需用Ca2+处理，使之变为感受态细胞，利于外源DNA侵染；④表示利用化学方法催化二硫键的形成，合成具有生物活性的胰岛素，属于对蛋白质的加工，人体内胰岛素加工是在胰岛B细胞的内质网中进行。