Question

土壤中的苯酚(C₆H₅OH)对环境有极大的污染，实验室希望能从土壤中分离出能专一性降解苯酚的微生物，如图是部分实验过程，回答下列问题：

（1）为了分离纯化目的菌种，①～④步骤的培养基中都加入了一定浓度的苯酚，该物质能为微生物提供________，除此以外，培养基中一般都还需要水、____________等营养物质。

（2）制备步骤④所需要的固体培养基，操作顺序是：计算→称量→________→调pH→________→倒平板。为了在步骤⑤的平板上形成单个的菌落，涂布平板前，需要对培养液进行多次稀释，原因是____________________________________。

（3）研究人员想通过比较试管甲和乙中微生物的生长情况，来证明分离出来的微生物只能以苯酚作为碳源，若甲试管中的液体培养基中的唯一碳源是苯酚，那么，乙试管中培养基成分与甲相比，区别是__________________。研究人员对甲、乙两只试管进行接种时，所选菌种都来自步骤⑤平板上的同一个单菌落，这样做的目的是__________________________。

Answer

碳源 氮源和无机盐 溶化 灭菌 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成单个细胞 用其他碳源替代苯酚 保证甲、乙两支试管中的微生物种类是相同的

【解析】

由题图可知，从土壤中分离出能专一性降解苯酚的微生物的实验流程：取土壤样品→稀释样品→将稀释液涂布到以苯酚为唯一碳源的固体培养基上→鉴定。

（1）依题意可知，要从土壤中分离出能专一性降解苯酚的微生物，应在培养基中添加苯酚作为唯一碳源。除此以外，培养基中一般都还需要水、氮源和无机盐等营养物质。

（2）制备步骤④所需要的固体培养基，操作顺序是：计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板。为了在步骤⑤的平板上形成单个的菌落，涂布平板前，需要对培养液进行多次稀释，原因是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成单个细胞。

（3）若要证明分离出来的微生物只能以苯酚作为碳源，应用添加其他碳源和苯酚的液体培养基分别培养相同菌株，一段时间后，比较这两种培养基中微生物的生长情况。若甲试管中的液体培养基中的唯一碳源是苯酚，则乙试管中的液体培养基用其他碳源替代苯酚。为了保证甲、乙两支试管中的微生物种类是相同的，对甲、乙两只试管进行接种时，所选菌种都来自步骤⑤平板上的同一个单菌落。