Question

图是利用基因工程和植物组织培养技术获得新植株的过程，请回答：

（1）农杆菌的 Ti 质粒分布在细菌细胞的___________中，图中 A 表示 Ti 质粒上的___________，且 A 可转移至受体细胞，并整合在___________ 上。Ti 质粒上必须含有___________ ，以便检测受体细胞中是否导入目的基因。

（2）C→D 过程，需要使用_____处理，使 D 处于一种能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态， 这种细胞称为_____。

（3）在植物中，一些分化的细胞，经过有关___________的诱导，脱分化为具有___________ 能力的薄壁细胞，进而形成植物的愈伤组织。愈伤组织在一定的培养条件下，又可以再分化出幼根和芽，形成完成的小植株。在此培养过程中，要求无菌操作的原因是：_____________________________

Answer

细胞质 T-DNA 染色体的DNA 标记基因 Ca2+（CaCl2） 感受态细胞 （植物）激素 分生 ①杂菌会与培养物争夺营养 ②杂菌繁殖过程中会产生有毒的物质，使培养物迅速死亡

【解析】

分析题图：A是表示 Ti 质粒上的T-DNA，B是携带外源基因的DNA片段，C是含目的基因的重组Ti 质粒，D是含重组Ti 质粒的农杆菌，E是受体细胞。

（1）农杆菌的Ti质粒是拟核外环状DNA分子，分布在细菌细胞的细胞质，图中A表示Ti质粒的T-DNA；它可转移至受体细胞，并整合在受体细胞的染色体的DNA上，Ti 质粒上必须含有标记基因，以便检测受体细胞中是否导入目的基因。

（2）将目的基因导入微生物细胞常用方法是，用Ca2+处理微生物细胞，使其成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞。将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。

（3）在植物中，一些分化的细胞，经过激素的诱导，可以脱分化为具有分生能力的薄壁细胞，进而形成植物的愈伤组织；培养要求无菌操作的原因是杂菌的生长一方面会与目标培养物竞争营养，从而使其失去营养；另一方面会产生大量对目标培养物有害的物质，导致其不能正常生长甚至死亡。