Question

（三）生物技术及生命科学的应用。

下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点。

1. 若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，研究者需将该基因与质粒重组后，通过显微注射法（方法）注入到羊的中，则发育成的羊（转基因羊）有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。该转基因羊的培育涉及的过程有____（多选）。

A. DNA 自我复制

B. DNA 以其一条链为模板合成RNA

C. RNA 自我复制

D. 按照RNA 上密码子的排列顺序合成蛋白质

2. 转基因技术中通常用图1 中质粒作为载体，质粒的本质是_____。与转基因羊相比，克隆多利羊的诞生所运用的生物技术是____，该技术的理论基础是____。

3. 用图1中质粒和图2目的基因构建重组质粒，应选用____两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过____酶作用后获得重组质粒。

4. 若BamH I酶切的DNA 末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为______。

5. 蛋白酶具有广泛的应用前景，所以常产业化生产，如果蛋白酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的活性，则应选择图3中的____（A/B/C）固定化工艺。

Answer

1. ABD

2. 小型双链闭环的DNA分子 细胞核移植 细胞核全能性

3. BclI和Hind Ⅲ DNA连接

4.

5. C

【解析】

根据题意和图示分析可知：在质粒上存在BamHI、BclⅠ、BamHI和HindⅢ等四个酶切位点，其中BamHI的切割位点在两个抗性基因上都有，而抗性基因为载体的标记基因，因此不可用该酶切割；在目的基因上，BclⅠ、BamHI、HindⅢ和Sau3AⅠ四种酶也存在酶切位点，因此为防止任意连接，且在必须具备标记基因的情况下，应该选择的限制酶是BclI和Hind Ⅲ。

1.转基因羊的遗传物质是DNA，会发生DNA的复制，A正确；目的基因表达产生α-抗胰蛋白酶的乳汁的过程包括转录和翻译，其中转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程，B正确；转基因的遗传物质是DNA，RNA不能复制，C错误；翻译是按照RNA 上密码子的排列顺序合成蛋白质的过程，D正确。

2.质粒是细胞质中的小型双链闭环的DNA分子；与转基因羊相比，克隆多利羊的诞生所运用的生物技术是细胞核移植，该技术的理论基础是动物细胞核的全能性。

3.根据以上分析已知，用图1中质粒和图2目的基因构建重组质粒，应选用BclI和Hind Ⅲ两种限制酶切割，并将切割后的质粒与目的基因利用DNA连接酶连接。

4.根据表格分析，用BamH I酶切的DNA 末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为。

5.据图分析，ABC固定化酶的方法分别对应交联法、吸附法、包埋法，其中包埋法需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，故选C。