Question

常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖，不能利用木糖，自然界中某些酵母菌能利用木糖产生酒精。回答下列问题：

（1）若要从自然界收集的酵母菌菌株中筛选出能高效利用木糖的酵母菌种，筛选的基本思路是________。

（2）将筛选到的酵母菌放入培养液中扩大培养后，用稀释涂布平板法计数，每克样品中菌株数的计算公式为（C÷V)×M，该公式中代表稀释倍数的是___________；为了保证计数准确，一般选择菌落数为______的平板进行计数。对于需要长期保存的菌种，可以将菌液与灭菌甘油混合后，放在_________中保存。

（3）在酒精发酵过程中，发酵罐往往先通入无菌空气，目的是__________。如果发酵液灭菌不严格，含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌__________(填“能”或“不能”）将酒精发酵为醋酸，原因是_______。

Answer

将从自然界收集的酵母菌菌株接种到以木糖为唯一碳源的培养基中，在无氧条件下培养一段时间后，然后再取存活下来的酵母菌重复上述过程 M 30〜300 一20℃的冷冻箱 促进酵母菌快速繁殖 不能 酒精发酵旺盛时为无氧环境，好氧的醋酸菌无法生存

【解析】试题根据题干信息“常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖”，则在以木糖为唯一碳源的培养基中死亡，“自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精”说明这些酵母菌含有相关木糖发酵有关的酶的基因。

（1）根据题意分析，常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖，不能利用木糖，而自然界中某些酵母菌能利用木糖产生酒精，因此将从自然界收集的酵母菌菌株接种到以木糖为唯一碳源的培养基中，在无氧条件下培养一段时间后，然后再取存活下来的酵母菌重复上述过程，从而获得能高效利用木糖的酵母菌种。

（2）用稀释涂布平板法计数时，每克样品中菌株数=平板上生长的平均菌落数÷稀释液的体积×稀释倍数，因此公式中M表示稀释倍数；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30〜300之间的平板进行计数；对于需要长期保存的菌种，先将菌液转入灭菌后的甘油中，混匀后放在-20℃冷冻箱中保存。

（3）酵母菌是兼性厌氧型微生物，因此在酒精发酵过程中需要先通入无菌空气，让酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；由于酒精发酵旺盛时为无氧环境，好氧的醋酸菌无法生存，因此在酒精发酵旺盛时，醋酸菌不能将酒精发酵为醋酸。