Question

淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。回答下列问题：

（1）从土壤中筛选产淀粉酶菌株的培养基的碳源是_________。待培养基冷却凝固后，将平板________(填“正”或“倒”)放置。培养基接种之前首先要进行灭菌和倒平板处理，并检测培养基平板的灭菌是否合格，检测培养基平板灭菌是否合格常用的方法是____________。

（2）在稀释倍数为10⁵倍下涂布了三个平板（每次取0.1mL)，统计高产淀粉酶的菌落数分别为140、150、160，则稀释前1mL菌液中所含细菌为___________个。

（3）若要保存高产淀粉酶的菌种，使用______(填“平面”或“斜面”）培养基，在________℃温度下保藏。

（4）若把菌种接种到液体培养基上，持续振荡培养菌种比静置培养时的淀粉酶产量高，其原因是________。

Answer

淀粉 倒 在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养 1.5×108 斜面 4 振荡培养能提高培养液溶氧量、利于菌体与培养液的充分接触，促进菌体生长和代谢

【解析】试题分析：本题以淀粉酶的生产为素材，考查了微生物的培养、计数、筛选、保藏等方面的知识。需要学生掌握以下知识点：制作固体培养基时，通常是先计算、称量、灭菌、倒平板，在培养基中通常加入琼脂作为凝固剂，灭菌后的培养基冷却至50℃左右时进行倒平板，待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置；实验过程中防止杂菌污染的做法是培养基灭菌、接种过程无菌操作（接种环境灭菌，试管过火、超净工作台）等；统计菌落数目时，为了使结果准确，一般选择菌落数为30—300的平板进行计数，保藏微生物时，根据不同的要求可采取不同的方法。

（1）在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，从土壤中筛选产淀粉酶菌株应该取含淀粉丰富的土壤，产淀粉酶菌株的培养基的碳源是淀粉。待培养基冷却凝固后，将平板倒置放置。以避免培养皿盖上的水珠滴落污染培养基，培养基接种之前首先要进行灭菌和倒平板处理，并检测培养基平板的灭菌是否合格，检测培养基平板灭菌是否合格常用的方法是在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养。

（2）每克（ml）样品中的菌株数＝C/V×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表稀释平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。C=（140+150+160）/3=150个，V=0.1ml，M=105，把上述数据代入公式可得稀释前1mL菌液中所含细菌= C/V×M=150/0.1×105=1.5×108个。

（3）菌种保藏有两种方法，若要保存高产淀粉酶的菌种，应使用斜面培养基，在4℃温度下保藏。

（4）若把菌种接种到液体培养基上，持续振荡培养菌种比静置培养时的淀粉酶产量高，其原因是振荡培养能提高培养液溶氧量、利于菌体与培养液的充分接触，促进菌体生长和代谢。