Question

国家生活饮用水卫生标准规定：接种1 mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，在37℃下经24 h培养，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。回答下列问题：

（1）用无菌三角瓶取水样前，取样器（玻璃制品）需使用_____________法灭菌。取水前的这种无菌操作的目的是____________________________。

（2）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将30 mL水样平均分成3份进行过滤，再将3份滤膜分别放在，牛肉膏蛋白胨培养基上培养，培养时应将平板倒置，其原因是____________________。在培养过程中，不同时间所观察到的平板上菌落特征的差异有________________________（至少写出两点）。

（3）在37℃下经24 h培养，结果如下表：

	平板1	平板2	平板3
菌落数（个）	370	350	380

据上表结果判断，所取水样测定结果_____（填“符合”或“不符合”）饮用水的标准。

（4）该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目，可将滤膜放在含__________培养基上，计算培养基上______（颜色）菌落的数目。

Answer

高压蒸汽（或干热灭菌） 防止外来杂菌污染 防止冷凝水滴落污染培养基，也可使培养基表面的水分更好地挥发 菌落大小、数目、形状、颜色等 符合 伊红美蓝 黑色

【解析】试题分析：解答本题需要熟练掌握微生物的分离、计数与灭菌的方法。灭菌是指用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，使用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等；消毒是指用较为温和的物理和化学方法杀死物体表面或内部部分微生物（不包括芽孢和孢子），常用方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法，使用对象有操作空间、某些液体、双手等。统计菌落数目使用的方法有显微镜直接计数法和活菌计数法，其中活菌计数法即稀释涂布平板法，一般选取菌落数在30-300个的平板进行计数。

（1）用无菌三角瓶取水样前，取样器（玻璃制品）需使用高压蒸汽（或干热灭菌）法灭菌。取水前的无菌操作的目的是防止外来杂菌污染，以免干扰实验结果。

（2）平板倒置后既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止冷凝水滴落到培养基上，造成污染，影响实验结果；不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落一般都具有稳定的特征，如菌落大小、数目、形状、边缘特征、隆起程度、颜色等。

（3）表格中3个平板的平均菌落数为367个，则每毫升水中的菌落数为36.7个，低于国家规定的标准，因此所取水样符合饮用水的标准。

（4）测定饮用水中大肠杆菌的数目的方法：将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色，可根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数目。