Question

图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，其等位基因d位于图1中虚线方框内的碱基对为T-A，图2表示某质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC，↓GATC、CCC↓GGG。下列有关叙述不正确的是

A. 若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段，产生的DNA片段有537bp、790bp、 661bp三种长度

B. 从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，得到5种不同长度的DNA片段

C. 若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，则应选用BamHⅠ

D. 为了筛选出含有上述重组质粒的大肠杆菌，可选择添加抗生素B的培养基进行培养

Answer

B

【解析】SmaⅠ识别的序列为CCCGGG，切割会产生平末端；图1中DNA片段含有两个SmaⅠ识别位点，第一个识别位点在左端534 bp序列向右三个碱基对的位置；第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基的位置，从而两个位点切割后产生的DNA片段的长度分别为534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段长度为537bp、790bp、661bp，A正确；在杂合子体内含有基因D和基因d，基因D的序列中含有两个识别位点，经过SmaI完全切割会产生537bp、790bp和661bp三种不同长度的片段，基因d的序列中含有一个识别位点，经过切割后会产生1327bp和661bp两种长度的片段，综上所述，杂合子中分离到该基因的DNA片段经过切割后会产生4种不同长度的片段，B错误；能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的MboI，若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，所以要用BamHI来切割目的基因和质粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌，C正确；用限制酶BamHⅠ切割质粒会破坏抗生素A抗性基因，但不会破坏抗生素B抗性基因，所以导入重组质粒的大肠杆菌能在含有抗生素B的培养基上生存，因此为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素B的培养基培养，D正确。