Question

[生物——选修3:现代生物科技专题]

下图1所示为用PvuⅠ限制酶切下的某目的基因及其上DNA片段示意图；图2所示为三种质粒示意图。图中AP为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因。EcoRⅠ、PvuⅠ等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离。复制原点是在基因组上复制起始的一段序列，是指质粒在受体细胞中复制时的起点。

（1）组成片段D的基本骨架与细胞膜的基本骨架相同的元素是___________。

（2）图2中质粒A、质粒C能否作为目的基因运载体最理想的质粒？_________    (填“能”或“否”），请说明理由________________。   

（3）重组质粒成功导入受体细胞的概率一般仅在10^-7，用质粒B构建重组质粒，为了筛选出导入了重组质粒的大肠杆菌，在导入完成后，将所有大肠杆菌分别在含有四环素和氨苄青霉素的培养基中培养，大肠杆菌在两种培养基的生长状况不可能的是____________，可能性最大的是_____________。

（4）若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则需要将重组质粒导入至山羊的_________（细胞）中。

Answer

C、H、O、P 否 质粒A缺少标记基因；质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，会影响重组质粒的自主复制 在含四环素的培养基上能正常生长,在含氨苄青霉素的培养基上不能正常生长 在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上都不能正常生长 受精卵

【解析】试题分析：熟记并理解基因工程的基本操作程序等相关的基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上，从题意和题图中提取有效信息并围绕质粒载体必备的基本条件、基因工程的基本操作程序等知识，进行相关问题的解答。

(1)脱氧核糖和磷酸交替连接构成DNA片段D的基本骨架，脱氧核糖由C、H、O三种元素组成，组成磷酸的元素是H、P、O；磷脂双分子层构成细胞膜的基本骨架，磷脂分子是由C、H、O、N、P组成；可见，组成片段D的基本骨架与细胞膜的基本骨架相同的元素是C、H、O、P。

(2)分析图2可知：质粒A缺少标记基因，质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被限制酶切割，进而影响重组质粒的自主复制，所以质粒A、质粒C均不能作为目的基因运载体最理想的质粒。

(3)用质粒B构建重组质粒，当用和目的基因相同的限制酶（PvuⅠ）切割时，Tc（四环素抗性基因）遭到破坏，而AP（氨苄青霉素抗性基因）结构完好，因此在重组质粒导入完成后，将所有大肠杆菌分别在含有四环素和氨苄青霉素的培养基中培养，大肠杆菌在两种培养基的生长状况不可能的是在含四环素的培养基上能正常生长,在含氨苄青霉素的培养基上不能正常生长。因重组质粒成功导入受体细胞的概率一般仅在10-7，所以可能性最大的是在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上都不能正常生长。

(4)若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则需要将重组质粒导入至山羊的受精卵中。