Question

幽门螺杆菌（H·pylori)能导致严重的胃部疾病。科学家运用基因工程技术将幽门螺杆菌基因组的HspA基因成功导入烟草细胞，最终表达的疫苗使人体获得持久性的疾病防御能力。请回答下列问题：

（1）通常采用PCR技术扩增HspA基因，前提是要有一段已知HspA基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成__________，合成物质的作用是___________________。

（2）PCR技术扩增目的基因过程中使用的DNA聚合酶要耐高温的原因是____________________，这种酶能在热泉中被筛选出的原因是____________。

（3）将HspA基因插入农杆菌Ti质粒的_______中，然后用该农杆菌感染烟草细胞，最终将目的基因整合到烟草细胞的_________上。烟草细胞需要_________(填写过程）发育成完整植株。

（4）将幽门螺杆菌基因组的HspA基因表达的物质作为__________，引起人体的特异性免疫应答。

Answer

引物 作为DNA复制的起点 DNA的变性（或DNA的解螺旋）要较高温度 高温条件淘汰了大多数微生物 T-DNA 染色体DNA 脱分化、再分化 抗原

【解析】试题分析：获得目的基因的方法：①从基因文库中获取  ②利用PCR技术扩增  ③人工合成（化学合成）。有关PCR技术的相关知识：概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；原理：DNA复制；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物；过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链；PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。

（1）PCR技术的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，引物的作用是作为DNA复制的起点。

（2）PCR技术过程中，DNA变性是在高温下进行的，因此该过程需要耐高温的DNA聚合酶的催化；这种酶能在热泉中被筛选出来是因为高温条件淘汰了大多数微生物。

（3）农杆菌Ti质粒上含有T-DNA（可转移DNA），将目的基因（HspA基因）插入该DNA，然后通过农杆菌感染烟草细胞，最终可将目的基因整合到烟草细胞的染色体DNA上。导入目的基因的烟草细胞是高度分化都植物细胞，需要经过植物组织培养才能发育为完整的植株。

（4）幽门螺杆菌基因组的HspA基因表达的产物HspA是蛋白质，可以作为抗原引起人体的特异性免疫应答。