Question

科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。

⑴ ①过程构建的A是________________________。它必须将目的基因与_______________等调控组件重组在一起，才能通过分泌乳汁来生产人凝血因子IX医用蛋白。

⑵ 在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是________________

⑶ 进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生__________________，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。

⑷ 采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得很多转基因绵羊，这是因为______________________________________。

⑸ 蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过______________和________________，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。

Answer

（含目的）基因（的）表达载体 乳（腺）蛋白基因的启动子 保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞 免疫排斥反应 整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养获得大量细胞，通过核移植都可得到多个重组胚胎，再经胚胎移植培育出很多转基因绵羊 设计蛋白质的结构 推测氨基酸序列

【解析】试题分析：本题考查了转基因绵羊的培育过程，主要考查学生对于基因工程、胚胎工程的掌握和理解，这部分内容主要是识记和理解内容，难度适中。胚胎移植的生理基础：（1）供体与受体具有相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。分析题图：转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊涉及的技术手段有转基因技术、核移植、胚胎移植，据此答题。

（1）据图可知，过程A是（含目的）基因（的）表达载体，一个基因表达载体的组成，除了含有目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等，基因表达载体必须将目的基因与乳（腺）蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，才能通过分泌乳汁来生产人凝血因子IX医用蛋白。

（2）核移植的目的一般是获得供体的克隆体，如果不去掉受体卵母细胞的核，则新获得的细胞中遗传物质就是供受体遗传物质的总和，得到的不是供体的克隆体，因此在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞。

（3）胚胎移植时，一般选择发育良好的桑椹胚或囊胚。进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。

（4）因为整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养，通过核移植都可得到多个重组胚胎，再经胚胎移植培育出很多转基因绵羊，因此采用胎儿成纤维进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊。

（5）蛋白质工程的基本途径：从预期蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸系列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。