Question

水貂病毒性肠炎是由水貂肠炎细小病毒引起的急性传染病，具有较高的发病率和死亡率。某科研小组为生产兽用疫苗，制备水貂细小病毒空衣壳抗原（MEV-VP2蛋白），设计如下生产流程（①②③表示技术环节）。

⑴ ①中用PCR技术扩增目的基因，该过程中所用的模板是_______________________，所用的Taq酶的特点是________________________________。在获得大量目的基因后，需要使用的工具是_____________________________________________。

⑵ 被重组病毒感染后的蚕细胞需经过②________________________，以达到增加疫苗产量的目的。在此过程中需要通过控制________通入量，目的是_____________________。

⑶ 为检测样液中是否含有有效成分，在③中使用___________________进行检测。

Answer

(含)控制合成MEV-VP2蛋白的基因（的DNA片段） 高温下仍保持活性（耐高温） 限制酶 、DNA连接酶、家蚕杆状病毒 动物细胞培养 CO2 维持培养液的pH MEV-VP2抗体

【解析】试题分析：本题考查了基因工程、动物细胞工程及PCR技术的有关知识，要求学生能够掌握基因工程的工具以及工具酶的作用部位，掌握基因工程的原理和操作步骤，掌握PCR技术反应的原理、条件及动物细胞培养的过程及条件，再结合所学知识准确答题。

（1）PCR技术扩增目的基因时所用的模板是含有目的基因的DNA片段，由题干可知，该实验需制备MEV−VP2蛋白，因此模板为含有MEV−VP2蛋白基因的DNA片段。所用的Taq酶的特点是高温下仍保持活性（耐高温）。在获得目的基因后，需要使用的工具是限制酶、DNA连接酶、家蚕杆状病毒，需要用限制酶与连接酶将目的基因重组到家蚕杆状病毒DNA上。

（2）被重组病毒感染后的蚕细胞需经过②动物细胞培养大量增殖，从而得到大量的MEV−VP2蛋白，增加疫苗产量。在此过程中为了维持培养液的pH，需控制CO2的通入量。

（3）为检测样液中是否含有有效成分MEV−VP2蛋白，可使用MEV−VP2蛋白的抗体进行抗原—抗体杂交，从而检测样液中是否存在有效成分。