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某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下: 材料处理:称取新鲜...

某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下:

材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20 ℃、另一组置于-20 ℃条件下保存24 h。

DNA粗提取:

步骤一:将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL研磨液(含洗涤剂和食盐),充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。

步骤二:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。

步骤三:取6支试管,分别加入等量的____(填溶液名称及浓度)溶液溶解上述絮状物。

步骤四::在上述试管中各加入4 mL____试剂。混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表:

分析上述实验过程,回答下列问题:

(1)该探究性实验课题名称是_________________________________________

(2)步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是________________,食盐的作用是_______________

(3)步骤二中缓缓地搅拌,这是为了___________________,所加酒精溶液需冷却的原因之一是低温抑制_____________________的活性,可以防止DNA降解。

(4)上述实验中步骤三、步骤四的空缺分别为______________________________

(5)实验表明,_______________________获取的DNA量最多。

 

探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 溶解细胞膜 溶解 DNA 减少 (或防止)DNA断裂 DNA水解酶(或核酸水解酶或DNA酶) 2 mol/LNaCl 二苯胺 保存在-20 ℃的蒜黄 【解析】(1)表中信息显示,该实验有两个自变量:实验材料和温度,所以该探究性实验课题名称是:探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 (2)步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是溶解细胞膜,有利于细胞内DNA的释放。食盐的作用是溶解DNA。 (3)步骤二中“缓缓地”搅拌,这是为了防止DNA断裂,所加酒精溶液需冷却的原因之一是低温抑制DNA水解酶的活性,可以防止DNA降解。 (4)步骤二中得到的缠绕在玻璃棒上的絮状物是DNA。在鉴定DNA时,需将DNA溶解在2mol/LNaCl溶液中,所用的鉴定试剂为二苯胺,所以上述实验中步骤三、步骤四的空缺依次分别为2mol/LNaCl、二苯胺。 (5)表中的“+”越多表示蓝色越深,而DNA遇二苯胺(沸水浴)被染成蓝色,据此可知:保存在-20℃的蒜黄获取的DNA量最多。
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考点分析:
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某实验小组以洋葱组织为实验材料,进行DNA粗提取与鉴定的实验,实验主要过程如下图,回答下列问题:

(1)步骤一中需加入一定量的洗涤剂和____________对洋葱组织进行处理,加入前者是为了瓦解细胞膜结构,加入后者的目的是_________________。将搅拌和研磨后的物质进行过滤,即可得到含有DNA的滤液。

(2)步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤,可以采用以下几种不同的方法:

滤液中NaCl浓度在0.14 mol/L时可分离出DNA,若要再次提纯,需要将其溶解在________mol/LNaCl溶液中;

通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉,其目的是____________________

将得到的DNA粗提取物放在60~75 ℃水浴中保温10~15 min,蛋白质被破坏,但仍能得到纯度较高的DNA,说明了DNA ____________________

(3)步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是______,依据的原理是_______。得到纯净的DNA后,可利用DNA____________________在沸水浴条件下发生显色反应,来对其进行鉴定。

 

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下列与DNA粗提取与鉴定过程有关的叙述中,正确的是

A. 将猪的成熟红细胞置于清水中,红细胞涨破后将DNA释放出来

B. 2 mol/L的氯化钠溶液溶解提取物并离心后,须保留上清液

C. 在提取液中加入75%的冰酒精后蛋白质会与DNA分离并析出

D. 将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后溶液迅速变为蓝色

 

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DNA的粗提取过程中,初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的浓度及其名称分别是

①0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液

物质的量浓度为2 mol/LNaCl溶液

物质的量浓度为0.14 mol/LNaCl溶液

体积分数为95%的酒精溶液

物质的量浓度为0.015 mol/LNaCl溶液

物质的量浓度为0.04 mol/LNaCl溶液

A. ①③⑤

B. ③④

C. ②④

D. ②③④

 

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下列材料中不能作为DNA粗提取与鉴定的材料是

猪肝、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、菜花、豌豆、菠菜、高等植物的木质部导管细胞、高等植物的韧皮部筛管细胞

A. 有一项

B. 有二项

C. 有三项

D. 有四项

 

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在向溶解DNANaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是

A. 加快溶解DNA的速度

B. 加快溶解杂质的速度

C. 减小DNA的溶解度,加快DNA析出

D. 减小杂质的溶解度,加快杂质的析出

 

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