Question

某实验小组以洋葱组织为实验材料，进行DNA粗提取与鉴定的实验，实验主要过程如下图，回答下列问题：

（1）步骤一中需加入一定量的洗涤剂和____________对洋葱组织进行处理，加入前者是为了瓦解细胞膜结构，加入后者的目的是_________________。将搅拌和研磨后的物质进行过滤，即可得到含有DNA的滤液。

（2）步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤，可以采用以下几种不同的方法：

①滤液中NaCl浓度在0.14 mol/L时可分离出DNA，若要再次提纯，需要将其溶解在________mol/L的NaCl溶液中；

②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉，其目的是____________________；

③将得到的DNA粗提取物放在60～75 ℃水浴中保温10～15 min，蛋白质被破坏，但仍能得到纯度较高的DNA，说明了DNA ____________________。

（3）步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是______，依据的原理是_______。得到纯净的DNA后，可利用DNA与____________________在沸水浴条件下发生显色反应，来对其进行鉴定。

Answer

食盐（氯化钠） 溶解DNA 2 分解其中的蛋白质 具有较高的稳定性（或耐较高温度） 析出DNA DNA不溶于酒精，但酒精可以使蛋白质变性并与DNA分离 二苯胺

【解析】（1）进行DNA粗提取和鉴定时，步骤一中需加入一定量的洗涤剂和食盐（氯化钠）对洋葱组织进行处理，加入前者是为了瓦解细胞膜结构，加入后者的目的是溶解DNA，将搅拌和研磨后的物质进行过滤，即可得到含有DNA的滤液。

（2）步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤，可以采用以下几种不同的方法：

①利用DNA在浓度为0.14 mol／L的NaCl溶液中溶解度最低可分离出DNA；若要再次提纯，需要将其溶解在2mol／L的NaCl溶液中。

②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉，由于嫩肉粉中含有蛋白酶，可破坏其中的蛋白质。

③由于DNA具有较高的稳定性（或耐较高温度），将得到的DNA粗提取物放在60～75℃水浴中保温10～15 min，则蛋白质被破坏，可得到纯度较高的DNA。

（3）由于DNA不溶于酒精，但酒精可以使蛋白质变性并与DNA分离，故步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是析出DNA。得到纯净的DNA后，可利用DNA与二苯胺在沸水浴条件下发生显色（蓝色）反应，来对其进行鉴定。