Question

微生物培养技术在医疗、农业生产等方面均有应用。烧伤病人容易感染绿脓杆菌，临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。请回答下列相关问题：

（1）适于绿脓杆菌生长的培养基中的营养成分一般含有_______、_______水和无机盐，除了提供以上几种主要营养物质外，培养基还需要满足微生物生长对________、特殊营养物质以及氧气的要求。

（2）可采用稀释涂布平板法对绿脓杆菌进行分离计数，原理是_____________，统计平板上的菌落数，即可推测出样品活菌数；计数结果往往比实际活菌数低，是因为____________________。

（3）对培养基进行灭菌后，待培养基冷却至50℃时，需要在_____________附近倒平板。接种时所用的接种环在接种前后都需要通过________法灭菌。

（4）将分别含等剂量不同抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，在适宜条件下培养一段时间，结果滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对实验所用抗生素表现为__________填“敏感”或“不敏感”）。

Answer

碳源 氮源 pH 样品稀释度足够高时，稀释液中的一个活菌可在平板上出一个单菌落，稀释液体积和稀释倍数已知 （涂布稀释液时）如有两个或多个细胞连在一起，（经过培养）平板上观察到的只是一个菌落 酒精灯火焰 灼烧 敏感

【解析】试题分析：熟记并理解培养基、无菌技术、纯化微生物的方法等与微生物的实验室培养和分离相关的基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上结合题意作答。

(1)绿脓杆菌属于细菌，其培养基中的营养成分一般含有碳源、氮源、水和无机盐，除了提供以上几种主要营养物质外，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

(2)若对绿脓杆菌进行分离计数，需采用稀释涂布平板法将含有绿脓杆菌的菌液接种于固体培养基表面进行培养，其好处在于可得到单个的菌落（或可将菌群分散成单个的细菌）。

(3)对培养基进行高压蒸汽法灭菌后，待培养基冷却至50℃时，需要在酒精灯火焰附近倒平板。在接种前后所用的接种环都需要通过灼烧灭菌。

(4)含等剂量不同抗生素的相同大小的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对实验所用抗生素表现为敏感，已经被抗生素杀死。