Question

大肠杆菌的纯化包括制备牛肉膏蛋白胨培养基和纯化大肠杆菌两个环节，试分析回答：

(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_______、______和渗透压等条件。

(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行______；操作者的双手需要进行清洗和_______；空气中的细菌可用_______杀灭。

(3)通常，对培养获得的纯菌种还可以依据________的_________、_______等特征对细菌进行初步初步的鉴定和分类。要进一步鉴别大肠杆菌，还要根据微生物的代谢特点，在培养基中加入____________。

(4)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。

(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_____________.

Answer

温度 酸碱度 灭菌 消毒 紫外线 菌落 形状 大小 某种指示剂（伊红美兰） 比例合适 将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察是否有菌落产生

【解析】试题分析：本题考查大肠杆菌的相关的知识点，主要考查灭菌和消毒、菌种的鉴定等，根据问题涉及的具体内容回忆相关的知识，分析综合进行解答。

（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌；操作者的双手需要进行清洗和消毒；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。

(3)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。检测大肠杆菌的方法是在培养基中加人伊红美蓝，菌落具有（金属光泽的紫）黑色特征的可以认定为大肠杆菌。

（4）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，应保证样品稀释的比例适合。

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。