Question

Ⅰ.苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学设计实验从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株，请回答下列问题：

（1）苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K₂HP0₄、MgS0₄、苯酚和水，其中可作为碳源的有__________。

（2）将采集到的样品进行选择培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐____________，以达到增加苯酚降解菌浓度的目的。

（3）下图为平板划线法示意图，在图中____________（填图中序号）区域更易获得单菌落。制备平板培养基时除了需要水、无机盐及各种营养物质外，还必须添加______________________。

（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中2〜5号比色管的苯酚浓度应分别为______________________。

试管号	1	2	3	4	5	6
苯酚浓度（mg/L）	0					1

Ⅱ.番茄红素是一种类胡萝卜素（脂溶性），不溶于水，化学性质比较稳定，主要存在于番茄、西瓜等植物中。

（1）提取番茄红素常用____________（填“乙醇”或“石油醚”）萃取，理由是____________________。

（2）番茄红素提取实验的流程为：植物→粉碎→①→萃取→②→浓缩→番茄红素，其中，①表示________，②表示_____________。

（3）该实验操作过程中萃取环节采用水浴加热的原因__________________________。

（4）番茄红素粗品的鉴定方法是__________________________。

Answer

蛋白胨、苯酚 增加 ③ 琼脂（凝固剂） 0.2 0.4 0.6 0.8 石油醚 石油醚为水不溶性有机溶剂且具有较高的沸点 干燥 过滤 石油醚易燃，直接使用明火加热容易引起燃烧 纸层析法

【解析】试题分析：本题考查微生物的培养、分离与植物成分的提取。考查对培养基成分、微生物分离方法、色素提取、鉴定方法的理解和识记。解答此题，可借鉴叶绿体中色素鉴定方法鉴定番茄红素粗品。

Ⅰ.（1）培养基中的蛋白胨、苯酚均含有碳元素，可作为微生物培养的碳源。

（2）选择培养的目的是增加苯酚降解菌浓度，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐增加。

（3）平板划线法在划线的结尾③处菌体密度最低，更易获得单菌落。平板培养基为固体培养基，制备时必须添加琼脂（凝固剂）。

（4）根据1号～6号试管浓度成等梯度变化，且１号、6号试管浓度分别为0、1，可判断2〜5号比色管的苯酚浓度应分别为0.2 0.4 0.6 0.8。

Ⅱ.（1）提取番茄红素可用萃取法，萃取过程中需要较高的温度，石油醚为水不溶性有机溶剂且具有较高的沸点，而酒精可与水混溶，因此常用石油醚作为萃取剂。

（2）植物粉碎后应干燥，以利于有机溶剂的萃取；萃取后可过滤除去残渣。

（3）石油醚易燃，直接使用明火加热容易引起燃烧，因此萃取环节采用水浴加热。

（4）番茄红素粗品可用纸层析法鉴定。