Question

（14分）为研究白藜芦醇(简称Res)对胰腺癌细胞增殖的抑制作用会随着Res浓度和作用时间的增大而加强。请根据以下提供的实验材料和用具，提出实验思路，预测实验结果并进行分析。

材料和用具：培养瓶若干个、用DMSO溶液配制的浓度分别为15 μmol·L^－1、30 μmol·L^－1、60 μmol·L^－1的Res溶液，DMSO溶液，胰腺癌细胞悬液，细胞培养液，血细胞计数板，显微镜等。(要求与说明：DMSO溶液的浓度适宜，对胰腺癌细胞的增殖无影响；实验开始时和每隔24小时对胰腺癌细胞进行计数，至少进行4次细胞计数；细胞计数的具体操作过程不作要求；实验条件适宜)

请回答：

（1）实验思路：

①__________________________________________________________________；

②__________________________________________________________________；

③__________________________________________________________________；

④__________________________________________________________________。

（2）预测实验结果(在以下坐标系中，绘制胰腺癌细胞数量变化曲线)：

（3）分析与讨论：

①某研究小组为了增加对胰腺癌细胞数的估算方法，还使用了比浊计对各组的浑浊度进行了测定，可估算培养液中的胰腺癌细胞数，培养液中癌细胞数量越多，浑浊程度_________。

②胰腺癌恶性度高，病程短，一般出现症状时已属晚期，并很快发生转移。癌细胞容易在组织间转移的原因是__________________________。

Answer

（14分，除标明外，每空2分）

（1）①取培养瓶若干个随机分成4组，分别加入等量且适量的胰腺癌细胞悬液和细胞培养液，在显微镜下用血细胞计数板进行计数，并记录 ②向四组培养瓶中分别加入等量且适量的DMSO溶液、15 μmol·L－1的Res溶液、30 μmol·L－1的 Res溶液、60 μmol·L－1的Res溶液，置于相同且适宜的条件下培养 ③每隔24小时，分别取上述四组中的培养瓶内的细胞悬液，在显微镜下用血细胞计数板进行计数，并记录 ④对实验数据进行统计、分析与处理

（2）如图（4分）

（3）①越大（1分） ②癌细胞表面的粘连蛋白很少或缺失（1分）

【解析】（1）根据题意，本实验是为了验证白藜芦醇(简称Res)对胰腺癌细胞增殖的抑制作用会随着Res浓度和作用时间的增大而加强，故需要设置对照实验，实验的自变量是是否用藜芦醇处理胰腺癌细胞及Res浓度和作用时间，因变量是胰腺癌细胞数；要验证白藜芦醇对胰腺癌细胞的增殖有抑制作用，就需要设置培养液中不添加白藜芦醇的空白对照组和添加白藜芦醇的实验组；要验证白藜芦醇对胰腺癌细胞的增殖的抑制作用会随着Res浓度和作用时间的增大而加强，就要设置不同Res浓度处理的实验组；结合题给材料中的三种Res浓度，因此可确定整个实验设计为4组，即不用Res处理的空白对照组和3组不同Res浓度处理的实验组。通过上述分析，可设计本实验的思路为：①取培养瓶若干个随机分成4组，分别加入等量且适量的胰腺癌细胞悬液和细胞培养液，在显微镜下用血细胞计数板进行计数，并记录；②向四组培养瓶中分别加入等量且适量的DMSO溶液、15 μmol·L－1的Res溶液、30 μmol·L－1的 Res溶液、60 μmol·L－1的Res溶液，置于相同且适宜的条件下培养；③每隔24小时，分别取上述四组中的培养瓶内的细胞悬液，在显微镜下用血细胞计数板进行计数，并记录；④对实验数据进行统计、分析与处理。（2）根据题意可知，本实验为验证性实验，验证性实验的结果和结论是唯一的，即支持实验假设，因此本实验的结果应支持“Res对胰腺癌细胞的增殖的抑制作用会随着Res浓度和作用时间的增大而加强”这一结论，所以可根据这一前提条件画出对应的坐标曲线图。（3）①使用比浊计对各组的浑浊度进行测定，可估算培养液中的胰腺癌细胞数，培养液中癌细胞数量越多，浑浊程度越大。②由于癌细胞表面的粘连蛋白很少或缺失，导致癌细胞容易在组织间转移。