Question

微生物强化采油（MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提髙采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：

（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自______________________的土壤。

（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用_____________________培养基。常用的接种方法是平板划线和______________________。

（3）接种后，应密封培养的原因是该类微生物是厌氧型，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取__________________________________就可获得高效菌株。

（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为1000个/mL。该统计结果_________________(填“低于”或“高于”)实际值。

Answer

长期被石油污染(含石油多的） 选择 稀释涂布平板法 降油圈大的菌落 低于

【解析】本题考查微生物的分离和培养相关知识，意在考察考生的识记理解掌握程度。

（1）要获得某种微生物就需要到其相适应的环境中的去寻找，现在想分离筛选得到降解石油能力较强的细菌，所以应到长期被石油污染的土壤中去取样。

（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用选择培养基，即允许某种特定的微生物生长，而不允许其它微生物生长的培养基。常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法两种。

（3）降油圈越大说明该菌落的降解石油的能力越强，所以应选择降油圈大的菌落做为菌种。

（4）活菌技术法得到的数值通常低于细菌的实际值，因为我们看到的是多个细菌在一起形成的菌落，而不是单个的细菌。

点睛：两种纯化细菌方法优缺点的比较

项目

优点

缺点

平板划线法

可以观察菌落特征，对混合菌进行分离

不能计数

稀释涂布平板法

可以计数，可以观察菌落特征

吸收量较小，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延

稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低，是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。