Question

科技人员将人的干扰素基因导入大肠杆菌中并大规模培养，以提取干扰素用于制药。回答下列问题：

（1）人的干扰素基因一般来自cDNA文库，cDNA中__________(填“有”或“没有”)启动子。获得的目的基因可通过_________技术大量扩增，进行扩增的前提是___________。

（2）为使干扰素基因在大肠杆菌中高效表达，应将扩增后的干扰素基因片段正确插入载体的________和终止子之间，终止子的作用是_________________。

（3）检测人的干扰素基因在大肠杆菌中是否转录，用_______________作为探针进行检测。

Answer

没有 PCR 要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物 启动子 使转录在所需要的地方停止 放射性同位素标记的目的基因

【解析】试题分析：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达．从分子水平上检测目的基因的方法：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术

（1）人的干扰素基因一般来自cDNA文库，其属于部分基因文库，cDNA中不含启动子；获得的目的基因可以通过PCR技术大量扩增，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。

（2）基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因，其中启动子位于目的基因的首端，启动转录过程，终止子位于目的基因的尾端，终止转录过程，因此目的基因必须插入两者之间才能正确表达。

（3）检测目的基因是否转录，应该检测其转录的产物RNA，一般用分子杂交技术，即用放射性同位素标记的目的基因探针进行检测。

【点睛】解答本题的关键是检测手段的选择，如检测目的基因用DNA分子杂交技术，检测mRNA用分子杂交技术，检测蛋白质用抗原-抗体杂交技术。