Question

为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。

下列操作与实验目的不符的是

A. 用限制性核酸内切酶EcoRI和DNA连接酶构建重组质粒

B. 用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞

C. 在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞

D. 用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上

Answer

C

【解析】由题可知，目的基因两端具有限制性核酸内切酶的酶切位点，则应用限制性核酸内切酶切开质粒，然后用DNA连接酶催化目的基因和切开后的质粒形成磷酸二酯键，得到重组质粒，A与实验相符；由于农杆菌转化法适用于菊花这种双子叶植物，当植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类物质，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的质粒会转移进受体细胞，用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，可以将C基因导入细胞，B与实验相符；由题可知，质粒中添加的标记基因是潮霉素抗性基因，则应该在培养基中添加潮霉素以筛选出被转化的细胞，在培养基中添加卡那霉素无法筛选，C与实验不符。具有互补碱基序列的DNA分子，可以通过碱基对之间形成氢键，形成稳定的双链区。根据这一特性，可以单链的目的基因DNA片段用同位素、荧光分子等标记后与被检测的DNA的同源互补序列杂交，从而检测目的基因是否导入了菊花染色体上，D与实验相符。