Question

某校生物兴趣小组为调查自来水水质，测定了自来水水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。 请回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量，涂布平板所用的培养基是______（填“固体”或“液体”）培养基，该培养基的制备过程是：计算→称量→溶化→灭菌→ ________，为使培养基满足细菌生长对pH的特殊要求，应在灭菌之 ______（填“前”或“后”）调节pH。

（2）培养基灭菌后，将1mL水样稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液，经适宜条件下培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样中的活菌数为___________。 要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种________作为对照进行实验。

（3）工业生产中，提取胡萝卜素的方法主要有三种，一是从植物中提取，二是从大面积养殖的岩藻中获得，三是利用 _____________  生产。从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是__________，用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤：粉碎、干燥、萃取、过滤、用蒸馏方法浓缩。胡萝卜素粗品的常用鉴定方法是 __________ 。

Answer

固体 倒平板 前 5.0×108 无菌水 微生物发酵 萃取 纸层析法

【解析】试题分析：

此题为选一内容，难度一般，要求考生具备能够独立分析，动手的能力，实验过程中需要注意的就是要严格遵循单一变量原则和对照原则，整个实验要保证无菌无毒的条件下进行。

（1）涂布平板法所用的培养是固体培养基，制备过程计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，灭菌之前应该调节PH，然后进行灭菌；

（2）将1mL水样稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液，经适宜条件下培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49。据此可得出每升水样中的活菌数为5.0×108，设计实验时遵循对照原则，还应该在另一平板上接种无菌水作为对照；

（3）提取胡萝卜素的方法有三种，包括微生物发酵进行生产，提取胡萝卜素常用的方法是萃取，胡萝卜素粗品的常用鉴定方法是纸层析法。

考点：培养基的类型及其应用、无菌技术

点睛：培养基的类型及其应用、无菌技术的相关知识，属于对理解层次的考查。意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确结论的能力。知识点拨：

1、微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

2、划线分离操作中的有关问题：

（1）进行恒温培养时，要将培养皿倒置的原因如果正放培养皿，则皿盖上形成的水滴会落入培 养基表面并且扩散开．如果培养皿中已形成菌落，则茵落中的细菌会随水扩散，菌落间相互影响，很难再分成单菌落，达不到分离的目的．因此恒温培养时，培养皿必须倒置．

（2）培养后判断是否有杂菌污染的方法

①从菌落的形态看，是否湿润、透明、黏稠，呈何种颜色等等，是区别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌的关键指标．

②用显微镜镜检观察其形态、大小，看是否有菌丝、孢子、芽孢等，这也是区别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌的关键指标．