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许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因(内含EcoRⅠ的酶切位点),其编码的产物...

许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ′基因(内含EcoRⅠ的酶切位点),其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal 和IPTG存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如图所示。请据图回答:

(1)限制酶EcoRⅠ的识别序列和酶切位点是-G↓AATTC-,SmaⅠ的识别序列和酶切位点是-CCC↓GGG-。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接相应的末端,连接的末端序列是___________________

(2)在构建基因表达载体的过程中,除了目的基因外,还必须有_____________、复制原点和标记基因等。

(3)菌落①②③中颜色为白色的是_____________,原因是___________________________________

(4)菌落中的目的基因是否表达,可采用___________________技术进行检测。

 

-TTAA 启动子和终止子 ③ lacZ′标记基因区插入外源基因后被破坏,不能表达出半乳糖苷酶,故菌落为白色 抗原一抗体杂交 【解析】分析题图:目的基因的左侧有限制酶EcoRI的识别序列,右侧是限制酶SmaI的识别序列,而质粒上只有限制酶EcoRI的识别序列,所以需要用限制酶EcoRI来切割质粒,用限制酶EcoRI和SmaI来切割含有目的基因的外源DNA分子,这样就使目的基因右侧无法与质粒连接,所以目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA。用限制酶EcoRI切割质粒时,会破坏质粒上的lacZ'基因,但切割后的质粒自身环化后,lacZ'基因又被修复,能表达产生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,所以菌落①②呈现蓝色;菌落③导入的是重组质粒,其lacZ'基因被破坏,不能表达产生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落颜色为白色。 (1)由图可知,目的基因的左侧有限制酶EcoRI的识别序列,右侧是限制酶Sma I的识别序列,而质粒上只有限制酶EcoRI的识别序列,所以需要用限制酶EcoRI来切割质粒,用限制酶EcoRI和Sma I来切割含有目的基因的外源DNA分子,这样就使目的基因右侧无法与质粒连接,所以目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA。 (1)由图可知,目的基因的左侧有限制酶EcoRI的识别序列,右侧是限制酶Sma I的识别序列,而质粒上只有限制酶EcoRI的识别序列,所以需要用限制酶EcoRI来切割质粒,用限制酶EcoRI和Sma I来切割含有目的基因的外源DNA分子,这样就使目的基因右侧无法与质粒连接,所以目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接限制酶EcoRI切割形成的末端,即-TTAA。 (2)构建的基因表达载体含有目的基因、标记基因、启动子和终止子。 (3)用限制酶EcoRI切割质粒时,会破坏质粒上的lacZ'基因,但切割后的质粒自身环化后,lacZ'基因又被修复,能表达产生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,所以菌落①②呈现蓝色;菌落③导入的是重组质粒,其lacZ'基因被破坏,不能表达产生B-半乳糖苷酶,在X-gal和IPTG 存在下,菌落颜色为白色。 (4)检测目的基因是否表达产生蛋白质,可采用抗原一抗体杂交法。  
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考点分析:
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瘦素是动物脂肪细胞分泌的一种蛋白质激素,机体脂肪储存量越大,瘦素分泌越多。下丘脑的某些细胞接受到瘦素信号后,机体能通过复杂的神经内分泌网络调节摄食行为。

(1)瘦素分泌到细胞外,随体液运送到全身各处,下丘脑中的某些细胞通过______________识别瘦素,瘦素起______________作用。

(2)现有两类患肥胖症的小鼠,A 类小鼠肥胖是瘦素受体基因缺陷所致,B 类小鼠肥胖原因未知。据以下实验结果回答问题:

组别

处理措施

正常饲喂一段时间后的实验结果

1

正常小鼠与A小鼠连体共生

正常小鼠摄食量明显减少,A小鼠无变化

2

正常小鼠与B小鼠连体共生

正常小鼠无变化,B小鼠摄食量略微减少

3

A小鼠与B小鼠连体共生

A小鼠无变化,B小鼠摄食量明显减少

 

(注:连体共生即通过手术使两只小鼠的血液循环贯通)

①根据实验结果推测,连体前A 小鼠体内瘦素的含量比正常小鼠______________,B 小鼠肥胖的原因最可能是________________________

②为使实验更具说服力,可增设一组处理措施为______________的对照实验,目的是______________

 

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人体内胆固醇合成后以低密度脂蛋白(LDL)形式进入血液,细胞需要时LDL与细胞膜上的受体结合成LDL—受体复合物进入细胞。下图是某组织细胞部分结构及生理过程的示意图。请据图回答:

(1)由图可知,LDL—受体复合物通过___________方式进入细胞,说明细胞膜具有_____________的功能。

(2)图中过程⑥→⑦→⑧→⑨说明溶酶体具有___________的功能。

(3)溶酶体中的多种水解酶从合成到进入溶酶体的途径是:___________→溶酶体(用数子和箭头表示)。

(4)溶酶体中的水解酶的最适pH为5左右,少量的溶酶体酶泄露到细胞质基质中不会引起细胞损伤,原因是_________________________________

 

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图一为糖类的概念图,图二是某种需要能量的蛋白质降解过程,科学家发现:一种被称为泛素的多肽在该过程中起重要作用。泛素激活酶E1将泛素分子激活,然后由E1将泛素交给泛素结合酶E2,最后在泛素连接酶E3的指引下将泛素转移到靶蛋白上。这一过程不断重复,靶蛋白就被绑上一批泛素分子。被泛素标记的靶蛋白很快就送往细胞内一种被称为蛋白酶体的结构中进行降解。整个过程如图二所示。请分析回答:

(1)如果某种单糖A为葡萄糖,则物质①是______________;如果物质③作为动物细胞中储能的物质,则物质③是______________

(2)如果某种单糖A与磷酸和碱基结合形成物质②,其中碱基是U,则形成的物质②是______________,它是构成_____________的基本单位之一;

(3)蛋白质在生物体内具有多种重要功能,根据图二材料可推测出蛋白质的一项具体功能是____________

(4)细胞内E1、E2、E3在蛋白质降解过程中所起的作用不同,从分子水平上分析,其原因是____________

 

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以下有关细胞中结构及物质的“骨架”的说法,正确的是

A. 真核细胞骨架是由蛋白质纤维组成的网架结构

B. 磷脂双分子层和蛋白质构成的生物膜的基本支架

C. 磷酸和脱氧核糖交替连接构成了脱氧核苷酸的基本骨架

D. 多糖、蛋白质、核酸和脂质等生物大分子以碳链为基本骨架

 

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下列过程未体现生物膜信息传递功能的是

A. 传出神经细胞兴奋引起肌肉收缩

B. 抗原刺激引发记忆细胞增殖分化

C. 胰岛素调节靶细胞对葡萄糖的摄取

D. 蔗糖溶液使洋葱表皮细胞发生质壁分离

 

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