Question

应用现代生物技术可以大量获得针对甲型H1N1病毒的抗体，并可用于临床治疗，如图表示制备该抗体的设想，请据图回答下列问题：

(1)在培育转入甲型H1N1病毒抗体基因的牛的过程中，①过程需要的工具酶是__________________________________________，②过程常用的方法是______________。

(2)转入甲型H1N1病毒抗体基因的牛可通过分泌乳汁来生产甲型H1N1病毒抗体，在基因表达中，甲型H1N1病毒抗体基因的首端必须含有__________，它是________________识别和结合的位点。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用____________技术，培养出多头相同的转基因牛。

(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体，Ⅰ最可能是__________细胞，Ⅱ代表的细胞具有____________________________的特点。

(4)制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术，与动物细胞融合过程不同，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用______________________对细胞进行处理，作用是除去______________。

Answer

限制酶、DNA连接酶 显微注射法 启动子 RNA聚合酶 胚胎分割 浆 既能在体外大量增殖，又能产生专一抗体 纤维素酶、果胶酶 细胞壁

【解析】试题分析：题图中①是基因工程中基因表达载体的构建过程，②是将目的基因（甲型H1N1病毒抗体基因）导入受精卵，③是是胚胎移植过程。Ⅰ是导入了目的基因（prG）的受体细胞，Ⅱ是筛选既能无限增殖又能产生特定抗体的转基因克隆细胞。

（1）由以上分析可知：①是基因工程中基因表达载体的构建过程，需要先用限制酶切割目的基因和运载体，后用DNA连接酶连接成重组DNA。将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。

（2）基因表达载体包括启动子、目的基因、标记基因和终止子等，所以在甲型H1N5病毒抗体基因的首端必须含有启动子。它是RNA聚合酶识别和结合的位点，③是胚胎移植过程，移植前需将受精卵培养到桑椹胚或囊胚时期再植入母体。因为来自同一胚胎的后代具有相同的基因型，所以要培养出多头相同的转基因奶牛，可以采用胚胎分割技术。

（3）只有浆细胞能分泌抗体，因此Ⅰ最可能是浆细胞(效应B细胞)细胞。导入prG后浆细胞才具备无限增殖的能力，因此筛选出的Ⅱ细胞既能无限增殖又能产生特定抗体。

（4）植物体细胞杂交在细胞融合之前要用酶解法去细胞壁，即用纤维素酶和果胶酶对细胞进行处理，以除去细胞壁。

【点睛】本题是基因工程和细胞工程中单克隆抗体制备过程的综合，需要学会对相关操作流程以及其中的操作方法和注意事项熟悉，才能顺利解答。