Question

利用紫外线诱变选育高产β━胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变菌不能在含有浓度为10^-5M的β━紫罗酮的培养基上生长。该菌是含多个细胞核的单细胞真菌，菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色。图甲为选育及提取获得β━胡萝卜素流程。

（1）三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是________。过程①的原理是________。

（2）培养基中的葡萄糖含量对菌体生长影响最大，葡萄糖为菌体生长提供________，为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加________，该培养基按用途分是________培养基。

（3）进行③过程时，应选取________色的菌落接种至液体培养基。为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种，⑤中采取重复________过程（填过程中的数字）。

（4）某同学进行过程乙的正确操作，平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_________________；只有少数菌能生长形成菌落的原因是_____________________。

（5）稀释涂布平板法计数：若将稀释10⁵倍的某细菌菌液，用稀释涂布平板法进行计数。在五个固体培养基上分别接种0.1ml该细菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，培养基上的菌落数分别为：20、40、152、154、156，则每升菌液中细菌数量为________个。

Answer

核糖体 基因突变 碳源（碳源和能源） 10-5M的β━紫罗酮 选择 橙红 ③④ 稀释涂布平板法 基因突变频率低，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖 1.255×1011

【解析】试题分析：分析图甲，图中过程①表示利用紫外线诱导基因突变，过程②表示微生物接种。结合图乙可知，平板中的菌落均匀分布，应采用了稀释涂布平板法），过程③④表示选择培养，过程⑥表示浓缩。

（1）三孢布拉霉负菌为真核细胞，细菌为原核细胞，它们共同具有的细胞器是核糖体。过程①中有紫外线照射可诱导基因突变。

（2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供碳源（碳源和能源）；由于未突变菌不能在含有浓度为10-5M的β━紫罗酮的培养基上生长，所以为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加10-5M的β━紫罗酮，属于选择培养基。

（3）菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色，所以进行③过程时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基。为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种，采取重复③④过程。

（4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示，所以该同学的接种方法是稀释涂布平板法；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是基因突变频率低，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖。

（5）稀释涂布平板法计数：若将稀释105倍的某细菌菌液，用稀释涂布平板法进行计数。在五个固体培养基上分别接种0.1ml该细菌菌液，适宜条件下培养一段时间后，培养基上的菌落数分别为：20、40、152、154、156，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，则每升菌液中细菌数量为（40+152+154+156）/4×105×1/0.1×103=1.255×1011个。