Question

下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，下图甲是某种基因表达载体及限制酶切割位点示意图，图乙是利用图甲所示的基因表达载体获得的含目的基因的表达载体。请回答下列有关问题：

（1）基因工程操作过程中，能作为载体的除质粒外，还包括_____________。质粒作为基因工程的载体，应具备的基本条件有________________________________________________（答两点）。

（2）某DNA片段经BamHⅠ酶切割得到的目的基因，能与图甲基因表达载体被__________（填“EcoRⅠ”或“Sau3AⅠ”）酶切割后的产物连接，原因是____________________________________________________。

（3）构建基因表达载体，需要限制酶和_____________等工具酶。图乙所示的表达载体能否在宿主细胞中表达目的基因产物，并说明原因。____________________________________________________。

Answer

噬菌体的衍生物、动植物病毒 能够自我复制、具有标记基因、具有一个或多个限制酶切割位点 Sau3AⅠ 这两种酶切割后产生的DNA片段具有相同的黏性末端 DNA连接酶 不能；图乙中目的基因插入在启动子的上游，目的基因不能转录

【解析】试题分析：本题考查基因工程，考查对基因工程工具和基因表达载体的理解和识记。解答此类题目，应观察、判断限制酶的识别序列，明确基因表达载体的四部分构成。

（1）基因工程操作过程中，能作为载体的除质粒外，还包括噬菌体的衍生物、动植物病毒。质粒作为基因工程的载体，应能够自我复制，使目的基因在受体细胞内稳定保存；具有标记基因，以便于目的基因的检测与鉴定；具有一个或多个限制酶切割位点，以便插入目的基因。

（2）BamHⅠ和Sau3AⅠ切割DNA后得到相同的黏性末端，可以通过碱基互补配对连接。

（3）构建基因表达载体，需要限制酶和DNA连接酶等工具酶。图乙中目的基因插入在启动子的上游，目的基因不能转录，不能在宿主细胞中表达目的基因产物。