Question

乳酸链球菌素(Nisin)是…种比较安全的生物型防腐剂，在人体的消化道内可被蛋白酶降解，并不会像抗生素那样改变肠道正常菌群，因此应用比较广泛。某兴趣小组拟验证Nisin对小鼠肠道菌群没有影响，进行了以下实验。

(1)实验步骤：

①选取状况良好、年龄和体重近似的小鼠20只，随机均分为A、B两组；

②A组小鼠用含1.0%Nisin的食物连续饲喂12周；B组小鼠用____连续饲喂12周作为对照，其他情况相同；

③搜集A、B组小鼠粪便制成悬浮液分别涂布于____上（填下列选项前的字母）；

a．全营养液体培养基
b．以Nisin为碳源的液体培养基

c．全营养固体培养基
d．以Nisin为碳源的固体培养基

④接种后置于____（填“有氧”或“无氧”）条件下培养，通过观察____，以初步鉴定小鼠消化道中的微生物类群；

⑤统计比较两组微生物类群的种类和数量，以验证结论。

(2)请根据以上步骤回答下列问题：

①在制作培养基时要满足微生物生长对pH的要求，调pH应在高压蒸汽灭菌之  ____ （填“前”或“后”）。

②若菌群中含有大肠杆菌，可在培养基中添加____制成鉴别培养基，可根据培养基中____色菌落的数目，计算出肠道中大肠杆菌的数量。除上述计数法外，还可以利用___ 在显微镜下直接观察统计菌体的数量。

Answer

用等量不含1.0% Nisin的同种食物 c 无氧 菌落的特征（大小、颜色、形状和隆起程度等方面） 前 伊红美蓝 黑 血细胞计数板

【解析】试题分析：探究实验需要遵循对照原则和单一变量原则。该实验的目的是探究乳酸链球菌素对小鼠肠道菌群的影响，因此可用含乳酸链球菌素的食物连续饲喂甲组小鼠12周（实验组），用含有等量的经过灭菌的乳酸链球菌素的相同食物连续饲喂乙组小鼠12周（对照组），通过观察菌落的特征来统计比较微生物的数量及比例。

（1）实验步骤：
①选取状况良好、年龄和体重近似的小鼠20只，随机均分为A、B两组；
②A组小鼠用含1.0%Nisin的食物连续饲喂12周；B组小鼠用用等量不含1.0% Nisin的同种食物连续饲喂12周作为对照，其他情况相同；

③该实验的目的是探究Nisin对小鼠肠道菌群的影响，而不是筛选出某种微生物，因此搜集A和B组（实验组和对照组）小鼠粪便制成悬浮液涂布于全营养的固体培养基上，故选c。
④肠道菌群生活在缺氧的环境中，因此接种后应该置于无氧条件下培养，通过观察菌落的特征以初步鉴定小鼠消化道中的微生物类群。

⑤统计比较微生物的数量及比例，分析得出结论。
（2）①制备培养基的步骤为：计算、称量、融合、调pH、灭菌和倒平板，即调pH应在高压蒸汽灭菌之前。

②伊红-美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌，因此可在培养基中添加伊红-美蓝制成鉴别培养基，可根据培养基中黑色菌落的数目，计算出肠道中大肠杆菌的数量。此外还可以利用血球计数板在显微镜下直接观察统计菌体的数量。

【点睛】解答本题的关键是掌握实验的设计原则，根据单一变量原则和对照性原则设计实验，并分析实验结果。