Question

我国一科研团队将小麦液泡膜Na⁺/K⁺逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到水稻细胞内，获得了转基因耐盐水稻新品种。回答下列有关问题：

（1） TaNHX2基因通过控制____________直接控制生物的耐盐性状。

（2）为检测目的基因在水稻细胞中是否成功导入，运载体上应含有特定的______________。

A.复制原点    B.启动子     C.标记基因

（3）将导入目的基因的水稻幼胚接种到诱导培养基上进行___________，培养出愈伤组织，然后愈伤组织形成水稻植株。

（4）为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取__________（填“总mRNA”或“TaNHX2基因mRNA”）并反转录成cDNA，再以反转录产物为模板，利用放射性标记的TaNHX2基因单链作为引物，通过___________技术进行基因扩增。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料矿增结果为阴性（无产物生成），则说明_____________________________________。

（5）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐实验，用________________作为对照。

Answer

蛋白质结构 C 脱分化 总mRNA PCR 目的基因（TaNHX2基因）仅在根细胞中转录，未在叶细胞中转录 非转基因幼苗，进行耐盐试验

【解析】试题分析：本题主要考查基因工程的相关知识，解题关键能识记基因工程的概念、原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题。

（1）根据题干信息，TaNHX2基因为Na+/K+逆向转运蛋白基因，由此可见，TaNHX2基因通过控制蛋白质结构直接控制生物的耐盐性状。
（2）为检测目的基因在水稻细胞中是否成功导入，运载体上应含有特定的标记基因。
（3）在植物组织培养过程中，将外植体培养成愈伤组织的过程称为脱分化。
（4）基因转录的产物为mRNA，为验证外源基因整合到水稻基因组后是否转录，可从转基因植株的细胞中提取总mRNA并反转录成cDNA，再以反转录产物为模板，利用放射性标记的TaNHX2基因单链作为引物，通过PCR技术进行基因扩增。若以根细胞为材料扩增结果为阳性（有产物生成），以叶细胞为材料扩增结果为阴性（无产物生成），则说明目的基因（TaNHX2基因）仅在根细胞中转录，未在叶细胞中转录。
（5）将生长至4叶期的转基因幼苗转入高浓度的NaCl溶液中培养，进行耐盐实验，用非转基因幼苗，进行耐盐试验作为对照。