Question

促红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人促红细胞生成素(rhEPO），生产流程如图，请回答下列问题：

（1）图中①所指的技术中，需要在进行过程中补充的物质是_______。图中②所指的物质是____，检测细胞能否表达出③的方法是_______技术。

（2）受体细胞选择仓鼠卵巢细胞系，主要是基于这种细胞的________特性。培养重组CHO 细胞时，除适宜的温度及无菌条件外，还需要保证的环境因素是________________，为防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，应____。

（3）科学家经过努力现已研制出了可以口服的EPO，为培育出乳汁中含有此类EPO的转基因牛，需选择__________作为受体细胞，在操作中可能涉及的胚胎工程技术主要有______________（要求填两项）。

Answer

原料和引物 mRNA 抗原——抗体杂交 可无限增殖 气体条件（5%CO2浓度） 定时更换培养液（定期换瓶） 受精卵 体外受精、体外胚胎培养、胚胎移植、胚胎分割

【解析】试题分析：据图分析可知：①和②过程都是获取目的基因的途径，①是利用PCR技术短时间内扩增目的基因，②是通过反转录法获取目的基因，获得此图是利用基因工程技术生产的重组人工红细胞生成素（rhEPO）期间要生产流程，最终产物是红细胞生成素（rhEPO），由此可推测出图中高效表达出③的重组CHO细胞是高效表达出红细胞生成素（rhEPO）的重组细胞。

（1）由图可知：①过程是PCR扩增目的基因技术，在生物体外复制，需要在复制过程中补充的脱氧核苷酸原料和2种引物。图中②为逆转录过程，模板是mRNA，③为红细胞生成素，属于蛋白质，因此可以用抗原——抗体杂交技术来检测。

（2）仓鼠卵巢细胞系能无限增殖，因此选择该细胞作为受体细胞，动物细胞要在95%空气加5%CO2的混合气体中培养，CO2主要作用是维持培养液的pH。细胞在培养液中培养过程中，营养物质逐渐被消耗，逐渐产生代谢废物和PH降低等等因素都会使细胞受到伤害，因此需要定期更换培养液。

（3）培养EPO的转基因牛，需选择受精卵作为受体细胞，因为受精卵全能性比较高。转基因牛的产生是有性生殖的一种，要经过体外受精、胚胎的早期培养、胚胎移植和胚胎分割等技术。