下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料,请分析回答下列问题。
资料1:巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌,能将甲醇作为其唯一碳源,此时AOX1基因受到诱导而表达【5’AOX1和3’AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子】。
资料2:巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒,所以科学家改造出了如图所示的pPIC9K质粒用作载体,其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组,将目的基因整合于染色体中以实现表达。
(1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组,应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上________________、 ____________限制酶识别序列, 这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。
(2)酶切获取HBsAg基因后,需用____________将其连接到pPIC9K质粒上,形成重组质粒,并将其导入大肠杆菌以获取____________。
(3)步骤3中应选用限制酶____________来切割重组质粒获得重组DNA,然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。
(4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功,在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选,转化后的细胞中HBsAg基因是否转录出mRNA,可以用____________方法进行检测。
(5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后,需要向其中加入____________以维持其生活,同时诱导HBsAg基因表达。
(6)与大肠杆菌等细菌相比,用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞,其优点是在蛋白质合成后,细胞可以对其进行____________并分泌到细胞外,便于提取。
某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后,对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌,当培养基温度下降到50℃时,在酒精灯火焰附近倒平板,待培养基冷却至室温,按照下表处理:
将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2~3天,观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题:
(1)上述实验的实验目的是__________。若E组的培养基表面有菌落生长,说明了____________________。
(2)培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为微生物生长提供__________和_________。“在酒精灯火焰附近”进行相关操作是为了____________________。
(3)实验过程特别强调温度控制,请简要说明下列温控措施的目的:
①“待培养基冷却至室温”的目的有____________________。
②“将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养”的目的是____________________。
(4)培养微生物时将培养皿倒置的目的是__________________。实验结束后,对使用过的培养基应进行__________处理。
萤火虫曾被视为七夕的浪漫礼物,如今却由于人们的大量采集与买卖而导致数量锐减,拯救萤火虫,刻不容缓。回答下列问题。
(1)萤火虫的发光需要荧光素、荧光酶以及ATP等多种物质,其中ATP主要在细胞中的___________(填具体的生物膜结构)产生,其发挥作用的机理是有远离腺苷的高能磷酸键水解,释放能量,核苷由___________构成。
(2)萤火虫的体色由位于2号染色体上的一组复等位基因A+(红色)、A(黄色)、a(棕色)控制,复等位基因的显隐性关系是A+>A>a,且A+A+个体在胚胎期致死;只有基因B存在时,上述体色才能表现,否则表现为黑色。现在有红色萤火虫(甲)与黑色萤火虫(乙)杂交,F1中红色:棕色=2:1,则亲本的基因型为___________,F1中棕色个体交配产生F2中黑色个体的概率是___________。
欲判断B、b基因是否位于2号染色体上,现利用F1萤火虫设计如下实验,请预测实验结果(不考虑交叉互换):
①实验方案:取F1中一只红色雄性萤火虫与F1中多只棕色雌性萤火虫进行交配,统计子代的表现型及比例。②结果预测及结论:
a.若子代表现型及比例为___________,则B、b基因不存在2号染色体上。
b.若子代表现型及比例为___________,则B、b基因存在2号染色体上。
图1是某地区的小河流从高山湖泊进入大河的示意图。请回答下列问题:
(1)高山不同海拔处分布着不同的植物,如山脚下生长着阔叶林,山顶上生长着针叶林,这是否体现了生物群落的结构?___________(填“是”或“否”)。
(2)当森林遭受持续的干旱气候时,树林往往扩展根系的分布空间,以保证获得足够的水分,维持生态系统正常的功能,这种现象反映出______________________。
(3)村庄稻田生态系统有卷叶螟、青蛙等生物,图2是能量流经卷叶螟的示意图,其中A—C代表能量,数值表示能量值(单位:J·hm-2·a-1)。图2中A的数值为___________J·hm-2·a-1。
(4)后来由于某种原因,村庄农田被弃耕多年,最终形成了荒地,田鼠在荒地上大量繁殖。生态学家为了监测和预报该生态系统鼠害的发生情况,对弃耕农田上的田鼠种群数量的变化规律进行了研究。结果表明,田鼠最初呈“J”型增长。该荒地田鼠的数量约为800只,若田鼠每繁殖一代种群数量比原来增加a倍,则在此条件下繁殖b代后,田鼠的种群数量为___________只。
AMP—PCP能与细胞膜上ATP跨膜受体蛋白结合,科研人员用AMP—PCP溶液处理三七叶片,测定其净光合速率,结果如下图1所示。请分析回答:
(1)由图1可知,随着AMP—PCP浓度增大,叶片的净光合速率________。保卫细胞中的K+浓度变化是引起气孔运动的主要原因,K+进入保卫细胞内,可导致气孔开放。请推测AMP—PCP影响叶片净光合作用的原因____________________。
(2)要验证上述推测是否正确,可用________溶液处理三七叶片作为实验组,用蒸馏水处理三七叶片作为对照进行实验,测定叶片的气孔开放程度和净光合作用速率。若实验组的气孔开放程度和净光合速率均_____对照组,则证明上述推测成立。
(3)图2为适宜条件下三七幼苗叶绿体中某两种化合物的变化。若T1时突然降低CO2浓度,则物质A、B分别指的是_____________(填“[H]”“ADP”“C3”“C5”)。
2016年塞卡病毒肆虐中南美洲,怀疑引致多个婴儿患上先天性小头畸形症(俗称小头症),引起全球关注。塞卡病毒是RNA病毒,该病毒会攻击胎儿的神经元,引起新生儿神经系统发育缺陷。回答下列问题:
(1)位于人大脑表层的大脑皮层,有140多亿个神经元,组成了许多神经中枢。语言功能与大脑皮层某些特定的区域有关,这些区域称________。如果某人听不懂别人的讲话,但却可以讲话,可能是_________区出现问题。
(2)研制中的塞卡DNA疫苗含有一段根据塞卡病毒设计的DNA片段,注射到猕猴体内,某些细胞会分泌出很多类似塞卡病毒的小粒子,这些小粒子可刺激B细胞增殖、分化成______________。据此分析,DNA疫苗和传统疫苗的区别之一是DNA疫苗本身不能充当_______________,不直接引起机体的特异性免疫反应。
(3)有报道称,塞卡病毒感染成年人,可引起患者免疫系统攻击自身神经组织引发中风,该疾病属于_____________(填“免疫功能缺陷”、“自身免疫病”或“过敏反应”)。