Question

[生物——选修1:生物技术实践]某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能髙效降解脂肪的菌株，请回答：

(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲，该培养基属于___________培养基。

(2)为避兔培养皿污染，需将培养皿呈_______状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行________处理。为了排除培养基被污染,需设置接种______的培养基作为空白对照。

(3)为了筛选出菌株，可将适童的__________试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围出现透明圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶，纯化菌种时，为了对活菌进行计数，可采用_________法接种于新的培养基平板上。

(4)试验操作应在酒精灯火馅附近进行的原因是______________。

Answer

豆油 选择 倒置 梯度稀释 等量无菌水 苏丹Ⅳ 稀释涂布平板 避免周围环境中微生物的污染

【解析】（1）依题意，欲筛选出能降解豆油的菌株，培养基中应只含有豆油而无其它碳源，不能降解豆油的细菌在此培养基上不能生存，从功能上讲，这类培养基属于选择培养基。

（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行梯度稀释处理。为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。

（3）由于脂肪遇苏丹Ⅳ试剂会出现红色，所以为了筛选出菌株，可将适量的苏丹Ⅳ试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是出现透明圈、不出现红色圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。分离纯化菌种时，为了对活菌进行计数，可采用稀释涂布平板法接种于新的培养基平板上，使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便纯化菌种。

（4）试验操作应在酒精灯火焰附近进行，从而避免周围环境中微生物的污染。

【点睛】本题主要考查学生微生物的分离培养的相关基础操作知识以及操作原理。所以熟记微生物培养过程中培养基的分类、用途和制备，无菌操作以及涉及空白对照进行检测等、微生物的分离方法的应用等是解决本题的关键。