Question

为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，为了检测培养基灭菌是否彻底，随机取若干灭菌后的____________平板放在恒温培养箱中先行培养了一段时间；然后，将1 mL水样稀释 100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为______________个。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过__________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是______________________。

（3）示意图A和B中    ，______________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果，另外一个图表示的接种方法在操作时需要用到的工具是_____________。

（4）如果想要检测河水中是否存在大肠杆菌，需在伊红美蓝培养基上进行培养，若存在大肠杆菌，则菌落呈现_____________色，那么从功能上来讲，该培养基属于____________培养基。

（5）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度___________。分析其原因是：振荡培养能_______培养液中________________的含量。

Answer

空白/未接种 3.8×107 灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 B 接种环 黑 鉴别 快 提高 溶解氧

【解析】试题分析：分析图 图中细菌的分离的方法为A表示平板划线法，B表示稀释涂布平板法。A平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；B稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底；由题意知1ml水样中的菌落数是（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×104个，每升水样中的活菌数为3.8×104×103=3.8xl07个/L。

（2）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是：将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。

（3）分析题图可知，A培养皿采用的接种方法是平板划线法，B培养皿采用的接种方法是稀释涂布平板法，其中平板划线法接种的工具是接种环。

（4）进入伊红-美蓝的培养基属于鉴定培养基，大肠杆菌在伊红-美蓝培养基培养，大肠杆菌菌落呈黑色（深紫色）。

（5）由题意可知，振荡培养比静置培养的细菌生长速度快，由此可以说明该细菌是需氧菌，由于振荡培养提高了培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，细菌生长速度加快。

【点睛】解答本题的关键是分析两个培养皿，确定两个培养皿中的接种方法分别是平板划线法和稀释涂布平板法。